免疫羊駝製備單域抗體
單域抗體的獲得現在普遍通過免疫羊駝並通過羊駝體內自身的抗體成熟階段來得到抗體基因，然後通過噬菌體展示篩選技術來從羊駝抗體庫中篩選得到最適合的抗體序列。整個流程主要包括羊駝免疫、噬菌體文庫構建和抗體篩選三個階段。
羊駝免疫的推薦流程：
1.準備抗原：一隻羊駝可以同時免疫1-5個抗原，每次免疫總的抗原量保持在1-2mg之間，體積在2mL以下，將抗原和佐劑1：1乳化使其形成均勻混合物，4°保存。
2.免疫羊駝：挑選好羊駝並確保動物適合，記錄耳號後開始免疫實驗。每次在羊駝頸部淋巴結附近分左右兩側注射，每側分2點注射，每點注射0.4mL混合好的抗原。免疫後觀察半小時確認羊駝狀態良好，無不適症狀。每2周免疫一次，一共進行7次免疫。
3.採血：在第6、7次免疫後間隔5-7天進行採血，採血從羊駝頸部靜脈採取，每次取25 - 30mL血液，分3個採血管收集。
4.血清分離：在第4、5、6次免疫前進行採血用於免疫評價，採血從羊駝頸部靜脈採取，每次取5mL血液；血液當天使用預冷25度離心機，400 xg離心30分鐘，分離保存上層血清。
5.分離淋巴細胞：在15mL的離心管中先加入3mL細胞分離液，然後緩慢加入3mL血液。加入血液時小心緩慢以防止血液和分離液混勻。之後離心機預冷至25度，400 xg離心30分鐘後，觀察離心管中血液分離情況，用200ul移液器小心吸取出中間棉狀上層免疫細胞至新的15ml離心管中，上層血清保存在新的離心管中，-80度保存。每管加入室溫放置的10mL PBS緩衝液，25度，400 xg離心20分鐘。去除上清液，每管加入室溫放置的5mL PBS緩衝液，25度，400 xg離心20分鐘。使用血球計數板計算細胞數目。去除上清液，根據細胞數目使用RNAiso Plus溶解分離得到的淋巴細胞得到107/mL溶解液，-80度保存。
免疫技巧：
1.羊駝的選擇是免疫實驗效果的關鍵。選擇健康強壯、精神狀態良好、體型適中的羊駝，挑選的羊駝毛色光亮，無受傷不適症狀可以極大增強免疫的效果。挑選好動物，先預養1周左右以淘汰有些不合格的動物，使後期的實驗能順利進行。
2.淋巴細胞的分離：及時的細胞分離可以有效阻止血液採集後的溶血以及達到最好的分離效果。
3.免疫週期的選擇可以影響免疫效果，根據經驗，1-2周免疫間隔可以使羊駝對大部分抗原有良好的免疫反應。
