【技術】關於豬藍耳病的六大疑問
問題一、為什麼藍耳病在許多場，是免疫或不免疫都有發病很嚴重，帶來很大損失？
我想不光是藍耳病，在我國豬病都有一個共性問題，就是診斷的問題。很多豬場發病在臨床現場一看就診斷，或實驗室一檢出藍耳病毒就診斷為藍耳病了。這裡要強調的是：藍耳病毒的檢出 ≠ 藍耳病的存在。
病是一個因病原造成臨床影響的過程，而病原可以是潛伏在體內，呈持續帶毒狀態，未見得一定有臨床問題。
另一方面，藍耳病現在大部分用活疫苗免疫防控，疫苗毒在一定的時間內都是可檢出的，所以檢出的病毒如果不做鑑別檢驗，可能會造成臨床上的誤診。
問題二、臨床上很多豬群檢出藍耳病毒已經是常態，那麼如何判斷這個豬場因為藍耳病毒的存在造成了疫情呢？
第一，在最近沒有免疫的情況下，使用雙份血清的評價方式。
即豬場一直在持續監測的狀態下，當感到臨床不穩定時採血檢測，和原來監測時的檢測結果對比。如果不穩定時血清PRRSV抗體值突然升高，一下子有較大的變化，可以考慮是藍耳病毒帶來的影響。
第二，在一個場疫情的早期，對早期有代表性的發病豬及時剖檢、採樣送實驗室進行檢測診斷。
如果不是在疫情早期採樣，或者已經採用了各種方法治療一段時間後再去做檢測，可能得出的診斷結論就會是多種病原混合感染，而不是這次疫情的病原。
可能現實中多數情況是，這個發病群等到檢測結果出來了再去採取措施控制已經來不及了。其實可以在發病初期在採樣檢測同時根據臨床判斷採取控制措施。這樣等診斷結果出來了，就算之前的判斷錯誤，也可以證實本次發病的原因是什麼，對今後的疫情防控也是有指導意義的。
問題三、藍耳病檢測採樣的靶組織和靶器官應該是哪些呢？
對藍耳病來說血樣是很好的靶樣品，另外我們應該對發病過程中臨床上有代表性的豬隻進行剖檢，採取病毒檢出率高的靶組織（藍耳病毒除了血液，扁桃體和肺是最重要的靶器官外，在肺門淋巴結和下頜淋巴結也可以檢出）。
作為藍耳病毒，其最重要的靶組織就是扁桃體和肺臟，血液作為最容易採集的樣品，在藍耳病的檢出中意義也是非常大的。
血液中病毒檢出時間較早，一般感染後3天左右就能從血液中檢出，同時持續的時間也非常長，可以達到2-3個月，所以作為活體檢測，血是最好的。作為死亡剖檢動物來說，扁桃體和肺臟是最重要的靶器官。
問題四、關於藍耳病如何做鑑別診斷，耳朵發藍就一定是藍耳病嗎？在實驗室檢測上如何區分高藍和經典毒株？
並不是耳朵發藍一定是藍耳病，末梢循環障礙時耳朵都會發藍。藍耳病有一個典型的症狀，就是眼結膜炎，開始可能是漿液性的，後面可能會發展成粘液性的。
高致病性藍耳病時20-40%的豬有神經症狀，因為藍耳病毒在後期會進入到腦組織中，造成一些神經症狀，可以看到運動障礙、抽搐、後軀麻痺等。扁桃體出血、潰瘍，肺組織實變。
在敗血症時可看到脾臟腫大淤血、梗死灶，但是這種腫大與豬瘟以及一些細菌性疾病時我們看到的脾腫是有區別的，除非後續繼發細菌感染，單一病毒造成的損傷是不太容易看到那種脾臟極度腫大的。
臨床上近年來在PRRSV鑑別檢驗這塊要做的工作很多。我們檢測藍耳病毒所用的PCR方法可能是各種各樣的，有些可能直奔高致病藍耳病毒的檢測去了，有些可能檢測的是經典藍耳。
事實上，在所有的病原檢測方法裡，沒有所謂針對經典藍耳病毒的，只有藍耳病毒通用的RT-PCR。因為藍耳病毒通用檢測方法是針對藍耳病毒最保守的片段設計的引物，而引物不同靈敏度也不同，作為藍耳病毒的檢測方法來說，使用最保守片段引物是最靈敏的，我們用的通檢RT-PCR就是這樣的方法。
比如使用通檢的RT-PCR方法檢出十個樣品裡面有八個陽性，而用檢變異株RT-PCR方法（引物），十個裡面檢出六個原來陽性較強的樣品。
不是說漏掉的那兩個弱陽性就是經典株，是因為兩種方法的靈敏度不同造成那兩個弱陽性樣本就沒有被檢出，假如送去測序它們有可能都是變異株。所以說使用通檢RT-PCR方法只能告訴你檢出來是藍耳病毒陽性，而不能確定是哪個毒株。
而接下來再用檢變異株的RT-PCR方法檢顯示一部分陽性一部分陰性，是因為後一種方法靈敏度比通檢的方法低，原來強陽性的現在檢出是陽，弱陽性的檢出就是陰了，而不能說那一部分變為陰性的就是經典株。
有些場檢出藍耳既有高致病的也有經典的，有可能是因為檢測方法靈敏度不同造成的對檢測結果的理解誤區。在通檢陽性的結果下，需要再做鑑別檢驗才能告訴你這個毒株是什麼類型。
問題五、藍耳病與臨床症狀相似的疾病如何做鑑別診斷？
對臨床症狀相似或相同的病做鑑別診斷，這點非常重要。有些場在臨床診斷上，把其他疾病引發的症狀歸結到藍耳病上。比如2012年在偽狂犬流行毒株造成的豬偽狂犬爆發場，發病豬肉眼看到與高致病性藍耳病相似的肺實變，但是做成組織切片就發現，情況大相徑庭。
病豬肺臟在組織學上看到的是壞死灶，這是偽狂犬的典型病變，因為偽狂犬病就是以灶性壞死為組織學特點。但是藍耳病毒主要在肺泡2型細胞和巨噬細胞增殖，肺組織除了間質性肺炎沒有其他變化。
之後在肺免疫組化染色中檢出的是偽狂犬病毒而沒有藍耳病毒。這些臨床表現相似的疾病在組織學中可以清晰的做區分。
問題六、現在在藍耳病毒的檢測中還需要區別野毒和疫苗毒，那麼豬場如何去區分是野毒感染還是疫苗毒，以及如何評價打苗以後的結果？怎麼去做檢測？
實際上藍耳病毒的抗體檢測方法有很多，但是對現在大規模樣品檢測來說，ELISA是一個相對方便能夠在臨床上推廣應用的方法。ELISA方法有很多商品化試劑盒，在國內用的最多的是兩類。一類是N蛋白包被的試劑盒，一類是糖蛋白包被的試劑盒。
那麼這兩類試劑盒的蛋白包被是一個什麼關係呢？
與病毒免疫原性相關性更好的是膜上的糖蛋白，而病毒感染首先激發的是跟核酸相關的N蛋白。
那麼在臨床下什麼情況下該選什麼蛋白包被的試劑盒呢？
N蛋白激發抗體產生時間很早，如果是一個沒有感染過藍耳病的地區或場，一定是用N蛋白來做防控預警。還有就是做雙份抗體的檢測，一旦出現N蛋白抗體在沒有免疫的情況下出現一個跳升，一定和藍耳病毒感染髮病相關性很大。
而作為疫苗的免疫效果的，則與糖蛋白相關性大，N蛋白產生的抗體只代表是不是有感染，與中和抗體及攻毒保護結果相關性不大。N蛋白抗體出現早，但是持續時間相對短，且與免疫保護相關性較小。糖蛋白抗體產生時間晚，且持續時間長，與免疫保護相關性更好，所以通常用它來做免疫後抗體水平監測，監測豬群是否處在保護狀態。
