眾所周知，除了通過複製直接裂解腫瘤細胞以外，溶瘤病毒（OV） 還具有激活免疫系統的抗腫瘤作用。然而，不像其他類型的免疫療法如檢查點抑制劑，OV還刺激體內的抗病毒免疫應答，包括誘導抗病毒中和抗體。
大多數人認為，患者體內預先存在或治療期間產生的中和抗體（NAb）是OV全身性遞送的障礙，使得重複劑量無效。這種擔憂不僅限制了適用的患者群體，還可能將全身性OV治療策略限制為“一次性”方法，意味著患者接受單次高劑量的OV或將OV直接注射到腫瘤。
事實上，FDA至今批准的唯一一個溶瘤病毒療法T-VEC僅適用於瘤內注射。
然而，近日發表在美國癌症研究協會（AACR）旗下出版物Cancer Immunology Research的一項研究表明，血液中稱為單核細胞的白細胞可以裝載OV/NAb複合物，在進入腫瘤部位時重新激活OV，從而保留其感染和殺死癌細胞的能力！
這項研究由英國利茲大學的Elizabeth Ilett博士和Rob Berkeley博士以及倫敦癌症研究所的Alan Melcher教授領導。
電子顯微鏡圖像顯示含有病毒顆粒的白細胞（以紅色圓圈顯示）。白細胞在進入腫瘤部位時可以重新激活病毒，從而保持其殺癌能力。
原來血細胞還是個好幫手
單核細胞（monocytes）是血液中最大的血細胞，也是體積最大的白細胞，是機體防禦系統的一個重要組成部分。該研究著眼於目前正用於臨床試驗的3種溶瘤病毒，並發現其中2種的中和形式可被單核細胞
重新激活！研究結果一覽
呼腸孤病毒：被患者血清中的IgG和IgA抗體中和
首先，該研究對Oncolytics Biotech公司的呼腸孤病毒進行了研究。
為確保高滴度的抗OV NAb，研究人員在治療後至少7天時，從臨床試驗接受了靜脈注射呼腸孤病毒的患者中採集血液樣本，並分離血清。
標準中和試驗表明，與對照供體血清相比，所有患者的血清均對呼腸孤病毒高度中和。其中，血清中呼腸孤病毒的特異性抗體為IgG和IgA抗體，並且IgG佔優勢，未發現IgM抗體。另外，熱不穩定補體對呼腸孤病毒的中和不起作用。
提出假設：血液中形成了呼腸孤病毒/NAb複合物
鑑於臨床前數據表明，儘管靜脈內（IV）遞送後血清中的NAb中和遊離呼腸孤病毒，但可通過血細胞將具有複製能力的病毒轉運至腫瘤。
為此，研究人員提出了一種模型，即呼腸孤病毒可以與NAb結合，形成呼腸孤病毒/NAb（ReoNAb）複合物，並通過血液中的單核細胞遞送至腫瘤部位。
他們將呼腸孤病毒與患者來源的血清/來自正常供體的對照血清一起孵育。電子顯微鏡圖像表明，IgG與呼腸孤病毒顆粒結合，證實了ReoNAb複合物的形成。此外，與對照血清（40％）相比，與患者血清（76％）孵育後的呼腸孤病毒顯示出更多的結合顆粒。
結果表明：ReoNAb複合物可以通過全身性治療形成，並且在重複給藥後濃度會增加。
單核細胞裝載ReoNAb複合物：能介導殺傷黑色素瘤細胞
實驗流程
流式細胞結果表明，與對照相比，僅用ReoNAb複合物處理的Mel-624細胞（一種黑色素瘤細胞）
沒有顯示出活力喪失；然而，當ReoNAb複合物裝載到單核細胞並與Mel-624細胞一起培養時，觀察到顯著的癌細胞死亡。進一步分析表明，僅用單核細胞培養的Mel-624細胞沒有活力喪失或生長速度降低，而當單核細胞裝載呼腸孤病毒後，能誘導96.5％~0.40％ Mel-624細胞死亡；裝載ReoNAb複合物後，誘導81％~2.74％ Mel-624細胞死亡。
上述結果表明，呼腸孤病毒被特異性抗體中和後形成的ReoNAb複合物失去了抗腫瘤活性，但當複合物裝載到單核細胞後，能誘導腫瘤細胞死亡，但與未被中和的病毒相比，殺癌效率較低。
ReoNAb複合物：被單核細胞內化並加工，釋放感染性病毒顆粒
研究人員還對裝載到單核細胞後reoNAb複合物的命運進行了研究。
他們發現，在釋放感染性病毒之前，ReoNAb複合物會先被單核細胞內化，並且內化過程涉及表面Fc受體（FcR），主要是在非經典單核細胞（CD16+）上表達的FcγR III。
多種腫瘤細胞及溶瘤病毒中得出一致結果
為了顯示reoNAb複合物通過單核細胞遞送細胞不是黑素瘤特異性的，研究人員還測試了其它組織學類型的腫瘤細胞。他們將裝載到單核細胞上的ReoNAb複合物分別被遞送至結直腸癌、前列腺癌和卵巢癌細胞，均導致顯著的細胞死亡。
此外，他們還從柯薩奇病毒（CVA-21）或單純皰疹病毒（HSV1716）臨床試驗的患者中獲得血清或胸膜液，用於產生CVA/NAb和HSV/NAb複合物。當直接與黑素瘤細胞一起培養時，這兩種OV/NAb複合物都沒有殺癌活性，表明病毒完全中和；而當裝載至單核細胞後，CVA/NAb與ReoNAb的抗癌活性相當，而HSV/NAb複合物則是無效的。
因此，抗OV NAb的存在會影響某些，但不是所有的溶瘤病毒療法。
小鼠體內驗證結果
在小鼠模型中，研究人員先從預先免疫的小鼠血清中採集ReoNAb複合物，並靜脈注射至小鼠體內。
結果發現：與對照組相比，ReoNAb複合物能有效減緩黑色素瘤的生長 ，並且在GM-CSF（黑色素瘤藥物）預先處理後能獲得更好的療效。
極大的臨床意義
這項研究初步證明，儘管OV全身給藥面臨抗病毒免疫力的障礙，但血液中的單核細胞可以維持OV的治療效力。
通訊作者Melcher教授說：“溶瘤病毒是一種非常令人興奮的新型癌症治療方法。不僅可以直接殺死癌細胞，而且與傳統的癌症治療相比，只有輕微的副作用，並且可以吸引免疫系統到腫瘤部位。目前，溶瘤病毒在直接注射到腫瘤部位時效果很好，但這意味著腫瘤必須位於體內可以用針頭到達的地方。”
以前認為，一旦身體產生抗病毒的抗體，後續劑量就沒有用了。這一研究有助於我們更好地瞭解病毒療法的工作原理，並且也增強了溶瘤病毒的治療潛力，同時為更多的患者擴大可選擇的免疫治療方案具有深遠的意義。
如果後續在人體中的結果一致，那麼就意味著中和抗體可能不會對溶瘤病毒療法造成太大的影響，至少對部分溶瘤病毒是這樣。
或者，人們才剛剛開始瞭解溶瘤病毒如何幫助我們治療癌症。
參考出處：
DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-18-0309
https://medicalxpress.com/news/2018-09-viruses-cancer.html
http://www.leeds.ac.uk/news/article/4288/viruses_show_new_promise_in_treating_cancer
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