众所周知，除了通过复制直接裂解肿瘤细胞以外，溶瘤病毒（OV） 还具有激活免疫系统的抗肿瘤作用。然而，不像其他类型的免疫疗法如检查点抑制剂，OV还刺激体内的抗病毒免疫应答，包括诱导抗病毒中和抗体。
大多数人认为，患者体内预先存在或治疗期间产生的中和抗体（NAb）是OV全身性递送的障碍，使得重复剂量无效。这种担忧不仅限制了适用的患者群体，还可能将全身性OV治疗策略限制为“一次性”方法，意味着患者接受单次高剂量的OV或将OV直接注射到肿瘤。
事实上，FDA至今批准的唯一一个溶瘤病毒疗法T-VEC仅适用于瘤内注射。
然而，近日发表在美国癌症研究协会（AACR）旗下出版物Cancer Immunology Research的一项研究表明，血液中称为单核细胞的白细胞可以装载OV/NAb复合物，在进入肿瘤部位时重新激活OV，从而保留其感染和杀死癌细胞的能力！
这项研究由英国利兹大学的Elizabeth Ilett博士和Rob Berkeley博士以及伦敦癌症研究所的Alan Melcher教授领导。
电子显微镜图像显示含有病毒颗粒的白细胞（以红色圆圈显示）。白细胞在进入肿瘤部位时可以重新激活病毒，从而保持其杀癌能力。
原来血细胞还是个好帮手
单核细胞（monocytes）是血液中最大的血细胞，也是体积最大的白细胞，是机体防御系统的一个重要组成部分。该研究着眼于目前正用于临床试验的3种溶瘤病毒，并发现其中2种的中和形式可被单核细胞
重新激活！研究结果一览
呼肠孤病毒：被患者血清中的IgG和IgA抗体中和
首先，该研究对Oncolytics Biotech公司的呼肠孤病毒进行了研究。
为确保高滴度的抗OV NAb，研究人员在治疗后至少7天时，从临床试验接受了静脉注射呼肠孤病毒的患者中采集血液样本，并分离血清。
标准中和试验表明，与对照供体血清相比，所有患者的血清均对呼肠孤病毒高度中和。其中，血清中呼肠孤病毒的特异性抗体为IgG和IgA抗体，并且IgG占优势，未发现IgM抗体。另外，热不稳定补体对呼肠孤病毒的中和不起作用。
提出假设：血液中形成了呼肠孤病毒/NAb复合物
鉴于临床前数据表明，尽管静脉内（IV）递送后血清中的NAb中和游离呼肠孤病毒，但可通过血细胞将具有复制能力的病毒转运至肿瘤。
为此，研究人员提出了一种模型，即呼肠孤病毒可以与NAb结合，形成呼肠孤病毒/NAb（ReoNAb）复合物，并通过血液中的单核细胞递送至肿瘤部位。
他们将呼肠孤病毒与患者来源的血清/来自正常供体的对照血清一起孵育。电子显微镜图像表明，IgG与呼肠孤病毒颗粒结合，证实了ReoNAb复合物的形成。此外，与对照血清（40％）相比，与患者血清（76％）孵育后的呼肠孤病毒显示出更多的结合颗粒。
结果表明：ReoNAb复合物可以通过全身性治疗形成，并且在重复给药后浓度会增加。
单核细胞装载ReoNAb复合物：能介导杀伤黑色素瘤细胞
实验流程
流式细胞结果表明，与对照相比，仅用ReoNAb复合物处理的Mel-624细胞（一种黑色素瘤细胞）
没有显示出活力丧失；然而，当ReoNAb复合物装载到单核细胞并与Mel-624细胞一起培养时，观察到显著的癌细胞死亡。进一步分析表明，仅用单核细胞培养的Mel-624细胞没有活力丧失或生长速度降低，而当单核细胞装载呼肠孤病毒后，能诱导96.5％~0.40％ Mel-624细胞死亡；装载ReoNAb复合物后，诱导81％~2.74％ Mel-624细胞死亡。
上述结果表明，呼肠孤病毒被特异性抗体中和后形成的ReoNAb复合物失去了抗肿瘤活性，但当复合物装载到单核细胞后，能诱导肿瘤细胞死亡，但与未被中和的病毒相比，杀癌效率较低。
ReoNAb复合物：被单核细胞内化并加工，释放感染性病毒颗粒
研究人员还对装载到单核细胞后reoNAb复合物的命运进行了研究。
他们发现，在释放感染性病毒之前，ReoNAb复合物会先被单核细胞内化，并且内化过程涉及表面Fc受体（FcR），主要是在非经典单核细胞（CD16+）上表达的FcγR III。
多种肿瘤细胞及溶瘤病毒中得出一致结果
为了显示reoNAb复合物通过单核细胞递送细胞不是黑素瘤特异性的，研究人员还测试了其它组织学类型的肿瘤细胞。他们将装载到单核细胞上的ReoNAb复合物分别被递送至结直肠癌、前列腺癌和卵巢癌细胞，均导致显著的细胞死亡。
此外，他们还从柯萨奇病毒（CVA-21）或单纯疱疹病毒（HSV1716）临床试验的患者中获得血清或胸膜液，用于产生CVA/NAb和HSV/NAb复合物。当直接与黑素瘤细胞一起培养时，这两种OV/NAb复合物都没有杀癌活性，表明病毒完全中和；而当装载至单核细胞后，CVA/NAb与ReoNAb的抗癌活性相当，而HSV/NAb复合物则是无效的。
因此，抗OV NAb的存在会影响某些，但不是所有的溶瘤病毒疗法。
小鼠体内验证结果
在小鼠模型中，研究人员先从预先免疫的小鼠血清中采集ReoNAb复合物，并静脉注射至小鼠体内。
结果发现：与对照组相比，ReoNAb复合物能有效减缓黑色素瘤的生长 ，并且在GM-CSF（黑色素瘤药物）预先处理后能获得更好的疗效。
极大的临床意义
这项研究初步证明，尽管OV全身给药面临抗病毒免疫力的障碍，但血液中的单核细胞可以维持OV的治疗效力。
通讯作者Melcher教授说：“溶瘤病毒是一种非常令人兴奋的新型癌症治疗方法。不仅可以直接杀死癌细胞，而且与传统的癌症治疗相比，只有轻微的副作用，并且可以吸引免疫系统到肿瘤部位。目前，溶瘤病毒在直接注射到肿瘤部位时效果很好，但这意味着肿瘤必须位于体内可以用针头到达的地方。”
以前认为，一旦身体产生抗病毒的抗体，后续剂量就没有用了。这一研究有助于我们更好地了解病毒疗法的工作原理，并且也增强了溶瘤病毒的治疗潜力，同时为更多的患者扩大可选择的免疫治疗方案具有深远的意义。
如果后续在人体中的结果一致，那么就意味着中和抗体可能不会对溶瘤病毒疗法造成太大的影响，至少对部分溶瘤病毒是这样。
或者，人们才刚刚开始了解溶瘤病毒如何帮助我们治疗癌症。
参考出处：
DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-18-0309
https://medicalxpress.com/news/2018-09-viruses-cancer.html
http://www.leeds.ac.uk/news/article/4288/viruses_show_new_promise_in_treating_cancer
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