DNA-XPress™ 快速提取試劑
英文：DNA-XPress™ Reagent
品牌：HiMedia
貨號：MB501
規格：100ml
用途：快速提取【DNA】
簡介
DNA-XPress為即用型無機試劑，用於從各種樣品中快速分離基因組DNA。獲得的DNA可用於下游PCR、分子克隆、酶切、雜交等應用。
原理
DNA-Xpress採用了新型胍離子活性裂解液，能水解RNA，選擇沉澱DNA。提取過程以Chomczynski方法為基礎，可靠、高效、簡易、快速。
樣本類型
血、動物細胞、動物組織、植物、細菌、酵母、病毒
操作流程
1. 製備勻漿液
1) 樣品和DNA-Xpress試劑充分混勻，可用移液槍反覆吹打，但動作勿劇烈。1ml DNA-Xpress試劑適合50mg組織、或10cm 2單層細胞、或107細胞（或細菌、酵母）、或50-200mg植物樣本。
2) 對革蘭陽性菌，從液氮取出後研為細粉，加DNA-XPress後，在60℃孵育1hr。
3) 對於革蘭陰性菌或酵母，菌體沉澱後，加DNA-XPress，反覆吹打以裂解菌體，在60℃孵育15-60min。
4) 對於液體樣本（如尿、糞便、膿滲出物）和病毒，1ml樣本加入10-15 ml DNA-Xpress。
5) 對全血，1ml全血加3ml紅細胞裂解液，室溫混勻5-10min，300g離心10min，棄上清。加1mlDNA-Xpress試劑，混勻，室溫孵育5min。
2. 相分離（僅適於植物，具體請參看原版說明書）
3. 離心（僅適於含大量細胞外基質的樣品，如肝臟，肌肉等，具體請參考原版說明書）
4. DNA沉澱
每1ml DNA-Xpress加入 1ml 乙醇 (96-100%) ，混勻，室溫靜置3min，DNA應肉眼可見，用吸頭挑出
DNA。若DNA量小，可5000g離心5min。
5. DNA清洗
用1ml 95%乙醇清洗2次DNA。第一次清洗後將其轉至離心管，最高速離心以去除乙醇。（對於肝腎、酵
母、革蘭陽性菌，可用1:1的乙醇和DNA-Xpress去除汙染物，再1,000 g離心1分鐘沉澱DNA。去除乙醇）
6. 溶解DNA
完全去除乙醇，風乾DNA沉澱5min。不要讓DNA完全乾燥，用新鮮製備的8mM NaOH溶解DNA。
DNA濃度、產率和純度
DNA片段最高可達20-50kb。用8mM NaOH或分子生物學級別水稀釋樣本，測260nm、280nm、320nm吸光度。OD260應在0.1~1.0，OD320用於背景校正。OD260=1對應約50µg/ml DNA。 純度=（OD260–OD320）/（A 280–A320），應在1.6~1.9。
注：含DNA-XPress的裂解物可在室溫（15-25℃）放置18h，或4℃或-20℃放置9個月。
收穫的DNA可能含降解的RNA，RNA濃度＜3%DNA。如果需要無RNA的DNA樣本，可加RNA酶A溶液（貨號：DS0003）。
存儲條件
室溫(15-25°C)保存1年。低溫會導致產品溶液中的異硫氰酸胍沉澱，加熱至55-65°C可使復溶。
參考文獻
1. Chomczynski P., Mackey K., Drews R.,Wilfinger W. 1997. DNAzol®: A reagent for the rapid isolation of genomic DNA.BioTechniques 22, 550-553.
2. Mackey K., Williams P., Seim S.,Chomczynski P. 1996. The use of DNAzol ® for the rapid isolation of genomic DNAfrom whole blood. Biomedical Products Supplement, 13-15.
3. Mackey K., Steinkamp A. and Chomczynski P.1997. DNA Extraction from Small Blood Volumes and Single-Tube DNA Extractionand Amplification Using Blood Filter Cards. Molecular Biotechnology, 9, 1-5.
4. Chomczynski P., Wilfinger W. and Mackey K. 1998. Isolation of GenomicDNA from Human, Animal and Plant Samples with DNAzol® Reagents. BiotechnologyInternational, 185-188.
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