質粒載體構建服務

CRISPR/Cas9系統是一種原核生物的免疫系統,是細菌用來抵抗病毒和外源質粒入侵的一種防禦機制。目前最成熟且應用最廣的是Type II的CRISPR/Cas9系統,其原理是利用gRNA特異性識別靶序列,並引導Cas9核酸內切酶對靶序列的PAM上游進行切割,從而造成靶位點DNA雙鏈斷裂,隨之利用細胞的非同源末端連接(NHEJ)或同源重組(HDR)的方式對切割位點進行修復,實現DNA水平的敲除、敲入或點突變。


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基因敲除方案

方案一

小片段敲除方案,gRNA設在外顯子2兩端的內含子中,敲除外顯子編碼鹼基數為非3倍數,敲除後可造成移碼。


方案二

移碼敲除方案,gRNA設在外顯子上,缺失的鹼基數為非3倍數,敲除後可發生移碼突變。


方案三

大片段敲除方案,將整個基因的編碼序列敲除,達到大片段敲除的效果。


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基因敲除載體分類

源井生物研發的基因敲除系列YKO載體,包括慢病毒載體、普通載體、腺相關病毒載體等,可廣泛應用於體外或體內研究。

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單gRNA載體

單gRNA載體,可應用於移碼或片段敲除的方案中,設計2-3個gRNA同時轉染細胞,可提高敲除效率,輕鬆實現基因敲除。

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gRNA載體

雙gRNA載體,可應用於大片段敲除的方案中,設計dual-gRNA構建在一個載體上,轉染細胞,可大大提高細胞轉染效率。

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質量控制標準:提供載體酶切和測序驗證報告。


針對不同基因編輯對象:不同類型細胞系,斑馬魚及大小鼠等。

針對不同基因編輯目的:移碼敲除,片段敲除,精確敲除,定點突變,片段敲入等,提供對應的gRNA載體和打靶載體供客戶選擇。





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