一、萌發菌生物學特性及生長習性
天麻種子萌發菌屬小菇屬的4種真菌是紫萁小菇（Mycena osmundicola）、蘭小菇（M orchicola）、石斛小菇（M dendrobii）、開唇蘭小菇（M anoectochila）。紫萁小菇用於天麻生產較早，石斛小菇伴播天麻種子發芽率最高。
（一）形態特徵
1. 紫萁小菇
菌絲半透明，鏡下觀察無色透明，有分隔。子實體散生或叢生。菌蓋發育前期呈半球形，後平展，灰褐色。菌褶白色，離生，放射狀排列。菌柄長0.3～3.10cm，粗0.6cm。孢子無色光滑橢圓形。
2. 石斛小菇
菌絲白色，擔子果高5～22mm，單生。菌蓋直徑3～6mm，帽狀或傘狀。菌褶近直生、光滑、白色。菌柄中生、細長、中空，3～19×0.5～1mm。擔子棒狀17.5～22×5～7.5μm，4孢，無色。孢子橢圓形。
（二）生長髮育特性
1. 菌絲和子實體的生長髮育
將感染了萌發菌的菌葉，置培養皿中保溼在海綿上，在25℃恆溫培養40天左右，在白色菌絲叢中分化菌蕾，2～3天后發育成菌蕾，3～6天后菌蓋平展，菌柄伸長，子實體發育成熟。
小菇屬萌發菌屬於真菌，其菌落、菌絲形態特徵相似，菌落規則，菌絲白色、氣生菌絲髮達，鎖聯合明顯，菌絲生長旺盛，以石斛小菇生長最快。
2. 腐生
這類真菌多腐生在高山林間落葉上，對纖維素有很強的分解能力，地面上的枯枝朽葉，感染這類真菌而被分解。天麻種子落在林地染此菌的樹葉上，可侵入天麻種子使其萌發，故小菇屬萌發菌主要營腐生生活，兼性寄生。
3. 好氣
萌發菌好氣，主要分佈在林間透氣性較好的枯枝落葉層和表層土壤中。
4. 其他
萌發菌對天麻塊莖無侵染能力，只侵染天麻種胚基部細胞。
（三）生長習性
1. 溫度
萌發菌在15℃～30℃溫度範圍內均能生長。以25℃菌絲生長最快，低於20℃或高於25℃菌絲生長速度減慢。
2. 基物含水量
一般適宜含水量為基物重量的60%～70%，含水量過高萌發菌生長速度減慢，甚至停止生長。
3. PH值
最適宜的PH值為5.0～5.5，鹼性條件不利於菌絲生長。
4. 營養條件
木屑與麥麩皮體積比為3：1的培養基適合萌發菌生長。萌發菌喜歡以闊葉樹樹葉、葡萄糖為碳源，蔗糖和麥芽糖的利用效果差；氮源則以麥麩為佳。
二、 蜜環菌生物學特性及生長習性
（一）蜜環菌形態特徵
菌絲體，是由菌絲分枝交錯形成，是此菌的基本結構。菌絲體又分菌絲和菌索。初生菌絲乳白色，鏡下觀察無色透明，有分隔。菌索是由無數菌絲結合在一起的根狀物、幼嫩時為棕紅色，有白色生長點，衰老時為黑褐色至黑色，無再生力。
子實體叢生，菌蓋肉質，扁半球形至平展，直徑3～11cm，蜜黃色；菌柄圓柱形：長4～12cm，直徑0.5～1.5cm；菌環上位；孢子橢圓形，無色透明（見上圖）。
（二）生長髮育特性
1. 菌絲和子實體的生長髮育
子實體成熟後釋放孢子於地面，在溫溼度適宜條件下萌發出初生菌絲，進而轉為次生菌絲和菌索。菌索表面有鞘包著，是蜜環菌適應不良環境的特殊結構，菌索有很多分枝，向周圍蔓延生長，尋找營養，故它在林間分佈廣泛，在10月低溫、高溼的環境下可長出子實體，又釋放出擔孢子。
2. 腐生，兼性寄生
多腐生在林間的枯枝落葉上，又可寄生在活樹上。
3. 好氣
在通氣良好的條件下，才生長旺盛。
4. 發光
蜜環菌菌絲和幼嫩的菌索在黑暗處會發出熒光。
（三）生長習性
1. 溫度
蜜環菌生長的溫度範圍為6℃～30℃，最適生溫度為25℃，超過30℃菌絲停止生長。
2. 溼度
蜜環菌適宜多雨溼潤的土壤，大氣相對溼度為80%～90%。
3. 光線
蜜環菌生長一般不需要光線，光照對蜜環菌生長有抑制作用。
4. 酸鹼度
適宜的酸鹼度為pH5～6。
5. 適宜的樹種
多種闊葉樹適宜蜜環菌生長，但以殼鬥科的青岡、板栗、槲櫟等，與蜜環菌有很好的親和力，最適宜蜜環菌生長。
三、萌發菌、蜜環菌的培養
萌發菌、蜜環菌的培養必須在無菌條件下進行，需要的常用設備有：接種箱或超淨工作臺、接種工具、恆溫培養箱、菌種培養架；高壓蒸氣滅菌鍋、電熱乾燥箱，紫外燈；菌種保藏箱，試管、天平等。
需要的化學藥品有：磷酸氫二鉀（K2HPO4），磷酸二氫鉀（KH2PO4），硫酸鎂（MgSO4.7H2O），葡萄糖，蔗糖，維生素B1，石膏粉，瓊脂，0.1%氯化汞（HgCl），75%酒精，甲醛，高錳酸鉀等。
萌發菌和蜜環菌的生長都需從基質中攝取碳源、氮源、無機鹽等營養物質而生活。所用的培養基將滿足其營養需要。
（一）萌發菌、蜜環菌一級菌種（母種）培養
1.分離材料的選擇與收集
（1）蜜環菌分離材料：
菌索：可在林間樹樁和枯樹根等處採集棕紅色的野生蜜環菌菌索，用靠近白色生長點生活力強的幼嫩部位為分離材料。
子實體：可在晚秋多雨季節，蜜環菌子實體出土時，採收新鮮、形態完整、健壯、無病蟲為害、將要成熟的蜜環菌字實體。
孢子：採集即將成熟的蜜環菌子實體，對其產生的孢子進行萌發分離。
（
2）萌發菌分離材料：小米麻：剛剛在野外條件下萌發的小米麻。
子實體：採集野外生長的小菇屬萌發菌子實體。
孢子：採集即將成熟的萌發菌子實體。對其進行孢子分離。
2.分離技術
（1）PDA培養基製備：去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、自來水1000ml、pH5～6。將馬鈴薯切片，加水煮沸30分鐘，用紗布過濾，取濾液1000ml並放入瓊脂加熱，使之全部深化，最後加入葡萄糖。然後將培養基趁熱分裝於試管內，經高壓滅菌（1.5kg/cm2）30分鐘。取出後按25度斜度放置冷卻後接種。
（2）消毒滅菌： 接種室滅菌，按每平方米用量計算：40%的甲醛溶液8ml，高錳酸鉀5g進行燻蒸。先關閉窗戶，取甲醛溶液裝入容器中，再放入高錳酸鉀，人隨之離開接種室，關閉房門，燻蒸1小時即可。燻蒸後應隔1天使用。
接種時，先將各種器具放入接種室內，開啟紫外燈滅菌30分鐘後即可工作。超淨工作臺或接種箱開啟紫外燈滅菌30分鐘後，再進行操作。
（3）分離方法
① 組織分離：
蜜環菌：將蜜環菌索或蜜環菌子實體用水洗淨表面泥土，然後切取需要的部份組織，用無菌水沖洗3次，放入0.1%昇汞溶液浸泡1分鐘；再用無菌水沖洗3次，洗去殘存的藥液，置於無菌培養皿內。將菌索分別剪成1cm長的小段或小塊，用滅菌濾紙吸去表面附著水液，然後接種於斜面培養基上，置25℃恆溫培養，3～7天左右，開始分別長出白色菌絲和菌索。分離子實體時，用無菌水沖洗消毒殘存藥液後，用滅菌濾紙吸淨水珠，再用解剖刀從菌蓋中縱向剖開了實體，在菌柄及菌蓋交界處取其0.5cm的一塊組織置於PDA培養基上培養。
萌發菌：將小米麻或萌發菌子實體用水洗淨表面泥土，然後切取需要的部份組織，用無菌水沖洗3次，放入0.1%昇汞溶液浸泡1分鐘；再用無菌水沖洗3次，洗去殘存的藥液，置於無菌培養皿內。用滅菌濾紙吸去附著在小米麻上的水液，用無菌鑷子搗碎小米麻，然後把搗碎的汁液接種於斜面培養基上，置25℃恆溫培養，3～7天左右，開始分別長出白色菌絲。分離子實體時，用無菌水沖洗消毒殘存藥液後，用滅菌濾紙吸淨水珠，再用解剖刀從菌蓋中縱向剖開了實體，在菌柄及菌蓋交界處取其0.5cm的一塊組織置於PDA培養基上培養。
② 孢子分離：萌發菌和蜜環菌的分離方法相同，即將開傘的子實體截去菌柄的下半部，用75%的酒精在菌蓋表面及菌柄部分進行揩擦消毒，然後菌褶向下插在孢子收集裝置的支架上。將支架放於無菌培養皿中，用鐘罩或大燒杯罩住以收集孢子。孢子落於皿內後，用接種針挑取少許，接於斜面培養基上培養。
3.菌種純化培養
在培養基上最初分離出的菌種，再進行提純培養以得到優良菌種，稱作純化。萌發菌選用菌落生長速度較為一致的菌絲體，用消毒的接種鏟連同培養基一起切取菌絲，轉移到新的培養基上培養，重複轉接可獲純菌種。蜜環菌在培養基上接種點處剛產生菌索分枝時，選擇其中生長旺盛而幼嫩的菌索，用接種鏟截取長2～3mm移入斜面培養基上，在25℃恆溫下培養，菌索長滿培養基後即為純化的一級菌種。
（二）萌發菌、蜜環菌二級菌種（原種）培養
1.萌發菌二級菌種培養
培養基成分：青岡、板栗等闊葉樹的木屑77%、麩皮15%、玉米粉5.45%、蔗糖1%、石膏粉1%、磷酸二氫鉀0.3%、硫酸鎂0.25%，將培養料的含水量調至65%左右。然後裝瓶，在瓶中心打直徑1cm的圓孔，深達培養基2/3處。蓋好瓶蓋，高壓蒸氣滅菌（0.1～0.15兆帕壓力，121～126℃）2小時，冷卻後接種。在接種室內，將菌絲連同約蠶豆大小的母種，接於培養基的圓孔中，一支母種可接原中5瓶左右，蓋好瓶蓋後置25℃培養室培養。
2.蜜環菌二級菌種培養
配方1：玉米芯粉30%，鋸末50%，麥麩19%，蔗糖1%，小樹枝段。
配方2：闊葉樹鋸末70%，麥麩30%，小樹枝段。
配方3：小樹枝段加清水。
製作時，先將手指粗的樹枝截成長1.5cm的小段，在水中浸泡10小時左右，使樹枝段充分吸水，然後將上述原料按比例充分混合、用水調含水量60%左右，裝入500ml菌種瓶中，每瓶裝入樹枝段50～60段，以瓶容量的4/5為宜，再加水少量，蓋瓶蓋後高壓滅菌（0.1～0.15兆帕壓力，121～126℃）2小時。冷卻至25～30℃，接入母種，置於25℃恆溫培養，30天～45天可長滿全瓶。
（三）萌發菌、蜜環菌三級菌種（栽培種）培養
1.萌發菌三級菌種培養。
闊葉樹樹葉57%、木屑20%、麥麩20.45%、硫酸鎂0.25%，磷酸二氫鉀0.3%、蔗糖1%、石膏1%。將培養料拌勻，含水量調至65%左右，裝瓶，高壓蒸氣滅菌（0.1～0.15兆帕壓力，121～126℃）2小時。冷卻後接入二級菌種，蓋好瓶蓋，移入培養室培養。
2.蜜環菌三級種培養。
培養料和培養方法與二級菌種培養相同。在高壓滅菌冷卻後，每瓶接入二級樹枝菌種1～2段，在25℃恆溫培養30～45天，蜜環菌可長滿全瓶，可用於培養菌枝和菌材。
（四） 菌種保藏
1. 一級菌種保藏
利用低溫對微生物生命活動有抑制作用的原理，當一級菌種長滿試管後，用牛皮紙包紮好，放入0℃～4℃的冰箱中，每隔4～6個月轉管培養1次。使用時，應從冰箱中取出先經適應常溫後再轉管培養，否則轉管不易成活。
2. 二級菌體和三級菌種保藏
二、三級菌種可在冷涼、乾燥、清潔的室內保藏，室溫宜控制在0℃～6℃，因蜜環菌在7℃～8℃可緩慢生長，保藏期2～3個月。
（五）蜜環菌枝培養
菌枝皮薄、木質嫩、蜜環菌易浸染，生長快，菌枝是培養菌床和菌材的優質菌種。
1. 菌種準備
應選用人工培養的栽培種。
2. 樹種選擇
多種闊葉樹種的樹枝可用於培養菌枝，但以殼鬥科樹種及樺樹等的樹枝最好。
3. 培養時間
根據需要，一般應在菌材培養期之前2個月進行。
4. 培養方法
選擇直徑1～2cm的樹枝，斜砍成長3～4cm的小段。其次，挖長2m，寬1m，深30cm的坑；坑底先鋪1cm厚溼潤樹葉，然後擺一層樹枝，再放入菌種，在菌種上再擺一層樹枝，蓋一薄層沙土，以覆蓋填滿樹枝間空隙為度。可依次堆放8～10層，蓋10cm厚沙土，再蓋一層樹葉保溫保溼。一般2個月可培養好菌種。
（六）蜜環菌材培養
1. 菌種準備
菌枝是培養菌材最好的菌種。選擇菌枝表面附著棕紅色、幼嫩、有白色生長點、無雜菌汙染的做菌種。也可用培養好的優質菌材作菌種。
2. 樹種選擇
蜜環菌與殼鬥科樹種有良好的親和力，同時，殼鬥科樹種材質堅硬，耐腐性強，樹皮肥厚不易脫落，是首選樹種。其次，薔薇科的野櫻桃，樺木科的樹種，易染菌且生長快，培養時短，也是培養蜜環菌材的好樹種。樹種選擇要根據當地樹木資源選用適宜蜜環菌生長的樹種。
3. 培養時間
應選擇在秋、冬季至春初培養菌材，在秋末至春初砍伐的樹木中含有較多的碳水化合物，樹皮與木質部不易分離，有利蜜環菌生長，有些樹種於春季又可萌發新枝。
4. 木材準備
選直徑3～5cm的樹木，鋸成長20cm的木段，若樹木直徑在10cm以上，應將木段劈成2～4塊，在木段的一面或兩面每隔3～4cm砍一個魚鱗口，深度至木質部為度。
5. 培養場地選擇
應選擇在天麻種植場地附近，減少菌材搬運；坡度應小於200和向陽的山地，土壤以土層深度，疏鬆透氣，排水良好的砂壤土，要有灌溉水源的地方為宜。
6. 菌材培養方法
培養方法有多種，現以窖培法為例。挖窖長2m，寬1m，深30cm。將窖底挖松整平，鋪一層1cm厚的樹葉，平放一層樹木段，如是幹木段應提前一天用水浸泡24小時，在樹木段之間放入菌枝4～5根，灑一些清水，澆溼樹木段和樹葉，然後用沙土或腐殖土填滿樹木段間空隙，並略高於樹木段為宜。再放入第二層樹木段，樹木段間放入菌枝後，如上法蓋一層土。如此依次放置多層，蓋土厚10cm略高於地面，最後覆蓋樹葉保溫保溼。
7. 菌材培養的管理
（1）調節溼度：主要是保持菌材窖內填充物及樹木段內適宜的含水水量即50%左右。應注意勤檢查，根據培養窖內溼度變化進行澆水和排水。
（2）調節溫度：蜜環菌索在6～28℃可以生長，超過30℃生長受抑制，同時雜菌易繁殖。在18℃～20℃溫度條件適宜蜜環菌生長。在春秋低溫季節，可覆蓋塑料薄膜提高窖內溫度。培養窖上蓋枯枝落葉或草可以保溫保溼。
四、種子培育
（一）建造溫室或溫棚
根據繁殖數量多少，建造簡易塑料溫棚或具有調控溫度、溼度，光照裝置的溫室培養種子。
（二）作畦
在棚內或溫室內作畦，畦長3～4m，寬1m，深15cm，用腐殖質土做培養土，用於種植種麻和播種。
（三）選種
選擇個體健壯、無病蟲害、無損傷，重量200g左右的箭麻做種。
（四）種麻種植時間
箭麻從種植到開花結果種子成熟需兩個月時間，故種麻應在播種期前兩個月種植。
（五）種麻種植方法
在畦內種植種麻，株距15cm～20cm，深度15cm，花莖芽一端靠近畦邊。
（六）管理
種麻種植後，棚內或溫室內溫度保持20℃～24℃，相對溼度80%左右，光照70%，畦內水分含量45%～50%。
（七）摘頂
現蕾初期，花序展開可見頂端花蕾時，摘去5～10個花蕾，減少養分消耗，利壯果。
（八）人工授粉
天麻花現蕾後3～4天開花，清晨4～6時開花較多，上午次之，中午及下午開花較少。授粉時用左手無各指和小指固定花序，拇指和食指捏住花朵，右手拿小鑷子或細竹籤將唇瓣稍加壓平，撥開蕊柱頂端的藥帽，沾取花粉塊移置於蕊柱基部的柱頭上，並輕壓使花粉緊蜜粘在柱頭上，有利花粉萌發。每天授粉後掛標籤記錄花朵授粉的時間，以便掌握種子採收時間。
（九）種子採收
天麻授粉後，如氣溫25℃左右，一般20天果實成熟，果實開裂後採收的種子發芽率很低，應採嫩果及將要開裂果的種子播種，其發芽率較高。掰開果實種子已散開，乳白色，為最適採收期。授粉後第17～19天；或用手捏果實有微軟的感覺；或觀察果實6條縱縫線稍微突起，但未開裂，都為適宜採收期的特徵。天麻種子壽命較短，應隨採隨播。
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