疫苗生產用的細胞培養基——SFRE 199

目前,動物細胞大規模培養已廣泛應用於人用疫苗、獸用疫苗、基因治療藥物等生物製品的生產。理想目標是實現細胞的高密度培養、高密度表達,保證大規模生產的產品質量。其中,用於細胞大規模培養的培養基是一大關鍵要素。


疫苗生產用的細胞培養基——SFRE 199

傳統疫苗生產多采用M199、DMEM、MEM等培養基加新生牛血清的方式,但由於血清成分的複雜性和不確定性,採用無血清細胞培養基已成為疫苗生產的發展趨勢。


SFRE 199是對M199培養基的改良型。和M199相比,SFRE 199顯著升高了8種氨基酸的濃度,包括精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨醯胺、穀氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸,也升高了葡萄糖的濃度,使能獲得最大的細胞生長而不表現出毒性。另外,加入了硫酸鋅、丙酮酸鈉和胰島素,降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度,還添加了半乳糖,以避免乳酸過度積累,並使細胞在維持的延長期內,pH值保持在生理範圍。


SFRE 199分為2種:SFRE 199-1與SFRE 199-2。其不同在於,前者含有Hank's鹽。而後者為Earle's鹽。SFRE 199最初用於Bak細胞(原代狒狒腎細胞)的生長和維持。國外有研究表明,SFRE 199不加胎牛血清即可用於培養Bak細胞,它與添加胎牛血清的常規培養基(M199、MEM)相比,細胞生長速率、產量和蛋白容量均相同,群體二倍分裂時間縮短,而生長的病毒滴度無明顯差別1,2。


疫苗生產用的細胞培養基——SFRE 199


Bak細胞超微結構。未受病毒感染的Bak細胞用SFRE 199-1培養後,胞漿中出現更多糖原樣小顆粒(和傳統培養基相比)2


Vero細胞是世界衛生組織和我國生物製品規程認可的疫苗生產細胞系,常用於生產狂犬病疫苗、流感疫苗、脊髓灰質炎疫苗、腸道病毒71疫苗等。Vero細胞無血清培養基的工藝開發,已成為各國的熱點。國外有研究表明,SFRE 199-1可作為無血清培養基的基礎成分,用於Vero細胞的培養3,並在Vero細胞靜置培養中,以SFRE 199-1為基礎的無血清培養基可獲得細胞生長效果4。


疫苗生產用的細胞培養基——SFRE 199

總之,對傳統培養基進行改良以獲得更高的細胞活力和密度、獲得更快的病毒增殖速度和更高的病毒滴度,已成為各個藥廠不斷努力的目標。細胞培養基的高品質和個性化,對目標的實現尤為重要。北京締一生物作為國際知名的細胞培養基生產商HiMedia的國內總代理,願與各個藥廠竭誠展開合作,提供國際品質的優質產品,為中國的生命科學助力加油!


註釋:


1. 吳長安. 無血清化學限定培養基對原代細胞的培養及其對病毒的敏感性. 國外醫學.生物製品分冊. 1981, 4:190-191


2. S.A.Weiss, et al. Chemically defined serum-free media for the cultivation of primary cells and their susceptibility to viruses. In Vitro.1980,16(7):616-628


3. Jack Litwin. The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. Cytotecnology 10:169-174,1992


4. Jack Litwin. The growth of Vero cells as suspended aggregates in serum-free medium.Animal Cell Technology, 1992: 414-417


HiMedia簡介:

1975年成立,國際知名的生物科學公司。近50年一直致力於細胞培養基和微生物培養基的研發和生產,是全球通過WHO GMP認證的培養基生產廠家,並具有ISO9001,ISO13485:2003認證,CE認證和FDA註冊登記。HiMedia公司具有先進的生產工藝和嚴格的質量管理體系,為製藥、疫苗生產、食品工業、實驗室科研等領域,提供高質量的產品。其產品已行銷全球140多個國家。



分享到:


相關文章: