新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

導讀

對於疑似病例應採集呼吸道或血液標本進行新型冠狀病毒核酸檢測,或病毒基因測序,如何進行標本採集?操作要點有哪些?醫護人員如何做好自我防護?

來源:醫脈通醫脈通編輯撰寫,未經授權請勿轉載。

新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

根據28日發佈的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第四版)》,對於疑似病例應採集呼吸道或血液標本進行新型冠狀病毒核酸檢測,或病毒基因測序。如何進行標本採集?操作要點有哪些?醫護人員如何做好自我防護?

同在28日,國家衛生健康委發佈了《新型冠狀病毒感染的肺炎防控方案(第三版)》,同時作為附件發佈了《新型冠狀病毒感染的肺炎實驗室檢測技術指南(第三版)》,對標本採集的具體要求和流程進行了詳細說明。

標本採集對象

  • 新型冠狀病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者;

  • 其他需要進行新型冠狀病毒感染診斷或鑑別診斷者;

  • 或其他需要進一步篩查檢測的環境或生物材料(如溯源分析)。

標本採集要求

1.從事新型冠狀病毒檢測標本採集的技術人員應經過生物安全培訓(培訓合格)和具備相應的實驗技能。

採樣人員個人防護裝備(personal protective equipment,PPE)要求:N95及以上防護口罩、護目鏡、連體防護服、雙層乳膠手套、防水靴套;如果接觸了患者血液、體液、分泌物或排洩物,應及時更換外層乳膠手套。

2.住院病例的標本由所在醫院的醫護人員採集。

3.密切接觸者標本由當地指定的疾控機構、醫療機構負責採集。

4.根據實驗室檢測工作的需要,可結合病程多次採樣。

標本採集種類

每個病例必須採集急性期呼吸道標本(包括上呼吸道標本和下呼吸道標本);重症病例優先採集

下呼吸道標本(如支氣管或肺泡灌洗液等);出現眼部感染症狀的病例,需採集眼結膜拭子標本;出現腹瀉症狀的病例,需留取便標本。可根據臨床表現與採樣時間間隔進行採集。

其他研究材料依據設計需求採集。

標本種類:

1.上呼吸道標本:包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物等。2.下呼吸道標本:包括深咳痰液、呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液、肺組織活檢標本。3.血液標本:儘量採集發病後7天內的急性期抗凝血。採集量5ml,以空腹血為佳,建議使用含有EDTA抗凝劑的真空採血管採集血液。4.血清標本:儘量採集急性期、恢復期雙份血清。第一份血清應儘早(最好在發病後7天內)採集,第二份血清應在發病後第3~4周採集。採集量5ml,建議使用無抗凝劑的真空採血管。血清標本主要用於抗體的測定,從血清抗體水平對病例的感染狀況進行確認。血清標本不進行核酸檢測。

5.眼結膜標本:出現眼部感染症狀的病例需採集眼結膜拭子標本。6.便標本:出現腹瀉症狀的患者需採集便標本。

標本採集方法

1.咽拭子:用2根聚丙烯纖維頭的塑料杆拭子同時擦拭雙側咽扁桃體及咽後壁,將拭子頭浸入含3ml病毒保存液(也可使用等滲鹽溶液、組織培養液或磷酸鹽緩衝液)的管中,尾部棄去,旋緊管蓋。

新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

2.鼻拭子:將1根聚丙烯纖維頭的塑料杆拭子輕輕插入鼻道內鼻顎處,停留片刻後緩慢轉動退出。取另一根聚丙烯纖維頭的塑料杆拭子以同樣的方法採集另一側鼻孔。上述兩根拭子浸入同一含3ml採樣液的管中,尾部棄去,旋緊管蓋。

新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

3.鼻咽抽取物或呼吸道抽取物:用與負壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。將收集器頭部插入鼻腔或氣管,接通負壓,旋轉收集器頭部並緩慢退出,收集抽取的粘液,並用3ml採樣液沖洗收集器1次(亦可用小兒導尿管接在50ml注射器上來替代收集器)。

4.深咳痰液:要求病人深咳後,將咳出的痰液收集於含3ml採樣液的50ml螺口塑料管中。

5.支氣管灌洗液:將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管(約30cm深處),注入5ml生理鹽水,接通負壓,旋轉收集器頭部並緩慢退出。收集抽取的粘液,並用採樣液沖洗收集器1次(亦可用小兒導尿管接在50ml注射器上來替代收集)。

新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

6.肺泡灌洗液:局部麻醉後將纖維支氣管鏡通過口或鼻經過咽部插入右肺中葉或左肺舌段的支管,將其頂端契入支氣管分支開口,經氣管活檢孔緩緩加入滅菌生理鹽水,每次30~50 ml,總量100~250 ml,不應超過300 ml。

7.血液標本:建議使用含有EDTA抗凝劑的真空採血管採集血液標本5ml,室溫靜置30分鐘,1500~2000 rpm離心10分鐘,分別收集血漿和血液中細胞於無菌螺口塑料管中。

8.血清標本:用真空負壓採血管採集血液標本5ml,室溫靜置30分鐘,1500~2000 rpm離心10分鐘,收集血清於無菌螺口塑料管中。

9.糞便標本:如患者發病早期出現腹瀉症狀,則留取糞便標本3-5 ml;

10.眼結膜拭子標本:眼結膜表面用拭子輕輕擦拭後,將拭子頭進入採樣管中,尾部棄去,懸緊管蓋。

新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

其他材料:依據設計需求規範採集。

標本包裝

標本採集後在生物安全二級實驗室生物安全櫃內分裝。

1.所有標本應放在大小適合的帶螺旋蓋內有墊圈、耐冷凍的樣本採集管裡,擰緊。容器外註明樣本編號、種類、姓名及採樣日期。

2.將密閉後的標本放入大小合適的塑料袋內密封,每袋裝一份標本。樣本包裝要求要符合《危險品航空安全運輸技術細則》相應的標準。

3.涉及外部標本運輸的,應根據標本類型,按照A類或B類感染性物質進行三層包裝。

標本保存

用於病毒分離和核酸檢測的標本應儘快進行檢測,能在24小時內檢測的標本可置於4℃保存;24小時內無法檢測的標本則應置於-70℃或以下保存(如無-70℃保存條件,則於-20℃冰箱暫存)。

血清可在4℃存放3天,-20℃以下可長期保存。

應設立專庫或專櫃單獨保存標本。標本運送期間應避免反覆凍融。

標本送檢

標本採集後應儘快送往實驗室,如果需要長途運輸標本,建議採用乾冰等製冷方式進行保藏。

1.上送標本

各省(自治區、直轄市)聚集性病例的標本,上送中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所進行檢測複核,並附樣本送檢單。

新冠肺炎的實驗室檢測,你應該知道的那些事兒

2.病原體及標本運輸

(1)國內運輸

新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性生物材料的運輸包裝分類屬於A類,對應的聯合國編號為UN2814,包裝符合國際民航組織文件Doc9284《危險品航空安全運輸技術細則》的PI602分類包裝要求;環境樣本屬於B類,對應的聯合國編號為UN3373,包裝符合國際民航組織文件Doc9284《危險品航空安全運輸技術細則》的PI650分類包裝要求;通過其他交通工具運輸的可參照以上標準包裝。

新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料運輸應按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規定》(原衛生部令第45號)辦理《準運證書》。

(2)國際運輸

新型冠狀病毒毒株或樣本在國際間運輸的,應規範包裝,按照《出入境特殊物品衛生檢疫管理規定》辦理相關手續,並滿足相關國家和國際相關要求。

(3)毒株和樣本管理

新型冠狀病毒毒株及其樣本應由專人管理,準確記錄毒株和樣本的來源、種類、數量,編號登記,採取有效措施確保毒株和樣本的安全,嚴防發生無用、惡意使用、被盜、被搶、丟失、洩露等事件。

來源:國家衛健委網站


分享到:


相關文章: