讀天書說人話，換個角度聊新聞。大家好，我是喵咖。
3月份以來，中國出口或捐贈的部分檢測試劑盒遭到了某幾個國家的質疑。拋開ZG上面的嘴仗和考量。試劑盒本身的性質值得討論。
我國主要的幾種檢測試劑盒都是基於RT-PCR原理。因為需要檢測的病毒樣本濃度有高有低，高的容易檢測，低濃度就會漏掉。所以PCR的方法就把病毒基因擴增很多倍，達到可以檢測出來的濃度。基本操作如下：
01
收集咽拭子等病毒樣本，通過試劑打碎保護病毒的蛋白質殼子，萃取病毒RNA。一方面是萃取，另一反面，打碎之後就沒有了感染性，相對安全一些。
02
由於這次新冠肺炎是單鏈RNA病毒，所以要先轉換成cDNA。這個可以類比像是視頻文件,mp4,rmvb,avi這些都是常見格式，同一個視頻不同格式，意思都一樣，可以互相轉換。
03
常規PCR反應，加熱到94℃把DNA拉鍊拉開，之後再55℃-60℃讓引物，就是拉鍊扣分別套在兩條拉鍊上，再升溫到72℃讓拉鍊自己複製，用左拉鍊做模板造一個右拉鍊，用右拉鍊做模板造一個左拉鍊。這樣折騰一次為一個循環，RNA數量翻一倍。之後再折騰25-30次。這樣就算很少量的病毒這個時候也顯現出來了。
PCR操作方法
這個方法很主流，也很經典。但是這個操作步驟太多，而且每次都是微量，手一抖就完蛋了。另外引物（就是拉鍊扣）的質量也是關鍵，如果複製錯了拉鍊，那麼整個檢測前功盡棄。
當然還有機器清洗的問題，如果上一個陽性樣本檢測之後，沒有洗乾淨設備，下一個本來陰性患者可能就會假陽性被誤診。中國大三甲醫院自己都有PCR檢測儀器和人員，流程比較熟練。美國歐洲很多醫院偏專科，綜合性超大型少一些，本來很多檢驗都是委託外包第三方實驗室。遇到疫情，著急出結果自己上手，可能有手法不純熟的情況。如果又正好使用了某些中國的無證試劑盒廠商出品的無證試劑，多重誤差疊加，準確度就會崩盤。
那麼雅培檢測試劑盒和國內主流試劑盒有啥不一樣呢？
這次雅培的五分鐘檢測試劑盒用的是一個完全不同的反應體系，簡稱RPA（重組酶聚合酶擴增），也叫做恆溫擴增技術。核心就是用三個主要原料：單鏈核酸重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶，在一個恆定溫度下37度到42度都可以，直接把DNA套成一個環，在本地施工作業，直接套用引物，複製目標DNA。
RPA技術優勢很顯著：
01
特別快，傳統PCR要45分鐘，因為要反覆升溫降溫。RPA由於是恆溫，所以只需要3-10分鐘。
02
靈敏度高，因為是高度定向擴增，所以樣品即便有點兒雜質也OK，免除了前處理環節，儘量多的保留了樣本。
03
溫度控制要求低，一般是加熱到40℃，但是在緊急情況下，貼在人身上用人體的體溫36℃、37℃也沒問題。甚至在室溫25℃，也是可以運行，就是慢點兒，要等一個小時而已。
04
適用性強，面對RNA病毒，直接在試劑里加入逆轉錄酶就好，一鍋端。
好處是很多，但是畢竟RPA也只能設計兩個引物，如果設計不好，可能就會錯誤的把其他病毒錯檢成新冠。但是雅培果然行業大佬，設計鬼斧神工，對照實驗中基本面對大量其他病毒，都沒有產生錯誤。
反過來，RPA由於太靈敏，之前的樣本有一點兒殘留在機器裡，下一個樣本就不準了。所以雅培的設計是徹底的全封閉一次性試劑盒。機器和樣本不直接接觸，只有激光掃碼這一塊。所有的試劑盒全部都是一次性應用，並且內部封閉樣本處理。這樣就避免了樣品交叉汙染，由此可以釋放檢測能力，盡情地檢測更低濃度的病毒。因此可以釋放檢測能力，盡情去檢測低濃度病毒。
好東西值得吹噓。但是說這臺是抗擊疫情的Game Changer還是過了。畢竟一次只能檢測一個，對於富人和偏遠地區是OK。但是對於大規模檢測的地方，比如說美國方艙醫院，PCR方案短期內還是沒法被替代。
1, Abbott RealTime SARS-CoV-2 For use under an Emergency Use Authorization (EUA) Only https://www.fda.gov/media/136258/download
2，ID NOW™ https://www.alere.com/en/home/product-details/id-now.html
3，重組酶聚合酶擴增技術研究進展 http://html.rhhz.net/SWJSTB/html/2016-6-47.htm
閱讀更多 喵咖2017 的文章
