急性缺血性卒中是最常见的卒中类型，占我国卒中患者的69.6%~70.8%，临床上以大脑中动脉阻塞最为常见。神经血管单元是美国国立神经病学和卒中研究所提出的一个卒中治疗的概念模型，由神经元、血脑屏障、小胶质细胞以及维持脑组织完整性的细胞外基质构成，是评价药物对卒中治疗效果的重要指标。基于此的动物实验显示，银杏内酯注射液对急性期脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用。
实验采用 Longa 法制备大鼠暂时性大脑中动脉阻塞（tMCAO）模型，于缺血1.5 h再灌后1 h给予银杏内酯注射液（0.625、1.25和2.5 mg/kg，i.p．，bid）及依达拉奉注射液（3.0 mg/kg，i.p.，bid），再灌注72 h后通过TTC染色、神经功能评分及脑水肿测定观察银杏内酯注射液对再灌注损伤的保护作用，应用免疫组化法观察药物对主要神经血管单元——神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞——形态和数量的影响。
结果表明，tMCAO模型后，Saline组大鼠缺血侧出现大片脑梗死区域，给予银杏内酯注射液 0.625、1.25、2.5 mg/kg以及依达拉奉注射液后，大鼠脑梗死区体积较Saline模型大鼠分别减小4.1%、17.8%、41.8%、29.5%，其中银杏内酯2.5 mg/kg组与依达拉奉3.0 mg/kg组大鼠脑梗死区体积与Saline模型组相比差异具有统计学意义（P<0.01，P<0.05，图1A、1B）。与脑梗死体积相似，给药组及阳性对照药依达拉奉组大鼠神经行为学评分、脑含水量均降低，其中银杏内酯注射液2.5 mg/kg组和阳性对照药依达拉奉3.0 mg/kg组大鼠较Saline组的差异具有统计学意义（图1C、1D）。银杏内酯注射液2.5 mg/kg具有治疗tMCAO模型所致大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的作用（图1）。
NeuN神经元免疫组化结果显示，基础状态下，银杏内酯注射液对大鼠NeuN+皮层神经元数量无显著影响。tMCAO-模型后（缺血再灌注后72 h），大鼠皮层神经元数量较基础状态下明显减少；缺血再灌注后1 h给予银杏内酯注射液，大鼠损伤侧皮层神经元丢失较模型组明显减少（图2）。
大鼠脑组织星形胶质细胞GFAP免疫组化结果显示，基础状态下，给予银杏内酯注射液对大鼠皮层星形胶质细胞增殖无显著影响；tMCAO-模型后（缺血再灌注后72 h），损伤侧大鼠皮层星形胶质出现GFAP深染、体积增大、突起增多，呈典型的活化状态。银杏内酯注射液组较tMCAO组星形胶质细胞的增殖与活化显著减少（P<0.05 ）（图3）。
大鼠脑组织小胶质细胞Iba-1免疫组化结果显示，基础状态下，给予银杏内酯注射液对大鼠皮层小胶质细胞增殖与活化无显著影响；tMCAO-模型后（缺血再灌注后72 h），损伤侧大鼠皮层小胶质细胞在局部不同程度地增生与聚集，突起回缩，胞体相对增大乃至阿米巴样，呈典型的活化状态，给予银杏内酯注射液显著减少tMCAO模型所致的大鼠皮层小胶质细胞增殖与活化的数量（P<0.05）（图4）。
大鼠脑内微血管CollagenⅣ免疫组化结果显示，基础状态下，银杏内酯注射液对大鼠脑内CollagenⅣ无显著影响；tMCAO-模型缺血再灌注72 h后，损伤侧Collagen Ⅳ染色微血管呈扩张、短而不连续状；给予银杏内酯注射液后，微血管较模型组多维持连续完整性（图5）。
神经血管单元是目前较热门的研究卒中治疗药物的概念模型。研究结果显示，银杏内酯注射液可以减轻tMCAO-模型急性期皮层神经元的丢失，抑制tMCAO-模型急性期星形胶质细胞和小胶质细胞的活化，抑制tMCAO-模型急性期微血管胶原蛋白的降解，保持血管内皮及血脑屏障的稳定性，全面保护神经血管单元。
综上所述，银杏内酯注射液具有减轻脑缺血再灌注损伤的作用，包括减少脑梗死体积、改善神经功能障碍、减轻脑水肿程度，具有治疗急性期缺血性卒中的可能，其作用机制及靶点可能是全面保护神经血管单元，维持神经血管单元各组分间的稳定性及平衡，起到多潜能神经血管保护作用。
参考资料：曹磊、兰新新、王林晓、丁建花、范益、胡刚，银杏内酯注射液对大鼠急性期脑缺血再灌注损伤的保护作用 ，《中国临床药理学与治疗学 》
编辑 | 丁慧鑫
审校 | 董晓慧
