作者：嚴湘紅
單位：長沙市中心醫院
“喂，您好，請問是檢驗科嗎？”
“您好，我這裡是檢驗科，請問有什麼事情嗎？”
“我是XX科，我有個病人查了個糖化血紅蛋白，怎麼說測不出結果呢？”
（測不出的糖化血紅蛋白？十有八九又是“它”在搗鬼。）
“這樣啊，您稍安勿躁，聽我慢慢說來……”
小小“糖化”不簡單
糖化血紅蛋白（glycated hemoglobin A1c，HbA1c）是血紅蛋白的一個子類，它是血紅蛋白β鏈N末端纈氨酸殘基和葡萄糖結合後所形成的一種穩定化合物。HbA1c能夠反映機體6～8周內的平均血糖濃度，因而成為監測糖尿病患者血糖情況的金標準，也為糖尿病患者降糖治療提供重要依據。2010年，美國糖尿病協會（ADA）首次將“HbA1c≥6.5%”作為糖尿病的診斷指標納入其《糖尿病治療指南》，因此HbA1c在臨床上的使用範圍已經從糖尿病的治療監測擴展成為糖尿病的診斷指標。
圖1 糖化血紅蛋白
測不出的HbA1c，到底是誰在搗鬼？
思緒回到這例測不出的HbA1c上來，看看這個病例到底怎麼回事：
患者，女，57歲，來院體檢。儀器報警“HbA1c比例檢測不出”，複查仍然報警測不出。查看當天HbA1c質控標本檢測結果均在控，其他患者HbA1c檢測結果與血糖檢測結果方向也基本一致（通常情況下，血糖高時，HbA1c結果也高；血糖正常時，HbA1c結果也正常）。再查看色譜圖，發現該患者HbA1c圖譜與正常HbA1c圖譜相比，多出了一個未知峰（圖2-1）。
圖2 HbA1c檢測結果（1圖為體檢患者圖譜，2圖為正常人圖譜）
從機理上來看，影響HbA1c濃度的主要有三個因素：一是患者的平均血糖水平，二是紅細胞壽命，最後就是血紅蛋白的糖基化速率。當機體平均血糖水平越高、紅細胞壽命越長、血紅蛋白糖基化速率越快，則HbA1c濃度越高。該例患者的血糖水平、紅細胞形態均正常（圖3），HbA1c檢測為什麼會測不出結果呢？
圖3 血糖和血常規結果
再看看HbA1c的檢測方法，目前主要有
三類方法：第一類，基於糖化血紅蛋白與非糖基化的血紅蛋白所帶電荷不同來區分HbA0和HbA1c，包括離子交換高壓液相色譜法（IE-HPLC）、毛細管電泳法等；
第二類，根據糖化血紅蛋白和非糖基化的血紅蛋白的結構差異，如硼酸鹽親和層析色譜法、免疫學方法等；
第三類，化學分析技術，如比色法和分光光度法。
其中第一、二類方法抗干擾能力強成為HbA1c的主流檢測方法，第三類多已淘汰。
我科HbA1c的檢測是採用離子交換高效液相色譜法進行的。
既然不是紅細胞壽命的問題，檢測方法也是主流的，那會不會是這個患者血液中存在變異的血紅蛋白在搗鬼？帶著疑問，我們加做了一個血紅蛋白電泳檢測。
圖4 血紅蛋白電泳圖譜（1圖為體檢患者結果；2圖為正常電泳結果）
這時，血紅蛋白電泳顯示患者體內存在異常血紅蛋白——HbE（圖4-1），一切都真相大白了。原來，正是“它”在搗鬼。很多情況下，變異血紅蛋白與正常血紅蛋白的不同點，僅僅在於一個位點的氨基酸的改變，從而改變了血紅蛋白表面電荷的分佈。由於離子交換HPLC檢測系統上血紅蛋白變異體不能與HbA0或HbA1c有效分離，這才導致出現了未知峰，儀器報警HbA1c無法檢測。
總結
綜上看出，HbA1c的檢測結果不僅與患者的平均血糖水平、紅細胞壽命和血紅蛋白的糖基化速率有關，還與血紅蛋白的自身特點有關。人體中存在血紅蛋白變異體，其中以HbS、HbC、HbD和HbE最為常見。而血紅蛋白變異體有可能引起紅細胞壽命和血紅蛋白糖化速率的變化，從而導致HbA1c結果與患者的臨床表現以及其他實驗室指標相矛盾，甚至出現HbA1c無法檢出的情況。
隨著糖尿病的發病率逐年提高及血紅蛋白變異體分佈人群的逐漸擴大，常見血紅蛋白變異體對於HbA1c結果解讀的影響顯得越來越重要。因此，當臨床上出現HbA1c結果與血糖水平指標（包括空腹、餐後2小時、連續血糖監測）不符合甚至出現HbA1c無法檢出結果時，應考慮到血紅蛋白變異體干擾了HbA1c檢測的可能。通過對HbA1c檢測反應圖譜的回顧分析，同時完善血紅蛋白電泳等相關檢測，瞭解血紅蛋白變異體對紅細胞壽命和血紅蛋白糖化速率的影響，才能更好的解讀糖化血紅蛋白結果，瞭解這部分人群的實際平均血糖水平。
來源：檢驗醫學網
