近日，桐樹生物自主研發生產的基於MULI-SEQ技術的工業級產品“目標序列測序文庫製備通用試劑盒（半導體測序法）”順利獲得食品藥品監督管理局頒發的醫療器械產品證書。
圖1 桐樹生物自主研發的MULI-SEQ文庫構建試劑盒獲得藥監局批准
目前，基於AMPLICON擴增子或者探針捕獲法的建庫試劑盒，其DNA投入量通常要求至少高於20ng。但由於腫瘤FFPE標本量有限或者保存不夠專業，常常面臨DNA投入量的限制而導致無法建庫或者強行建庫失敗。MULI-SEQ擴增子建庫試劑盒是桐樹生物自主研發針對二代測序PGM與Proton平臺開發設計的一款一體化文庫構建試劑盒，其獨特的多重PCR試劑及促連接劑組合設計使得該試劑盒操作簡單、方便。更重要的是，專業的MULI-SEQ建庫方案充分保證了超高的連接效率和極強的靶向擴增特異性，通過近3000例樣本的測試，當樣本投入量低至1ng時，文庫構建靶向捕獲率及均一性仍可達到95%以上，從而實現1ng投入量前提的99%建庫成功率，遠遠超越了目前市場上其他的常規擴增子建庫試劑盒。
圖2不同投入量（40ng，10ng，1ng）構建文庫無顯著性差別,on-target rate≥95%
圖3不同投入量（40ng，10ng，1ng）構建文庫無顯著性差別,均一性≥95%
40ng
10ng
1ng
圖4採用不同投入量（40ng，10ng，1ng）構建文庫，其主峰均位於150bp-250bp處，組間無顯著性差異
相比普通其他文庫構建試劑盒，桐樹生物自主研發的MULI-SEQ擴增子建庫試劑盒主要有以下三大核心優勢：
1. 起始量低：樣本低至1 ng就可以完成建庫，建庫的成功率接近100%，數據分析後均一性≥ 95.0% ； On-target rate ≥ 95.0%。
2. 構建高質量文庫：所有反應試劑均採取嚴格的質量控制和功能驗證，確保產品的最佳質量（均一性≥ 95.0%； On-target rate ≥ 95.0%），最大程度上保證文庫構建的穩定性和重複性。
3. 即用型試劑：建庫試劑盒中的所有試劑均為即用型試劑，極大簡化了操作過程，提高了操作效率和產量，並減少了汙染和誤差發生。
圖5. MULI-SEQ試劑盒建庫原理及相關技術特點
“採用此款試劑盒時，DNA樣本投入量低至1ng時，仍能實現99%的成功建庫，極大提高了針對低DNA含量樣本的建庫成功率”該試劑盒的研發主管張素芬女士說道，“當前，通過靶向捕獲的方式進行基因位點測序已成為高通量檢測領域的研究熱點，該技術既能保證建庫的高效性，又可避免全基因檢測帶來的財力浪費。在歷時長達1年的深入研究中，桐樹生物研發團隊對試劑盒配方進行改造升級，對文庫構建第一步多重PCR擴增反應與第二步消化過程進行深入研究，自主研發了基於高效多重PCR試劑及促連接劑組合的MULI-SEQ建庫方案，充分保證了超高的連接效率和極強的靶向擴增特異性，成功開發了桐樹生物MULI-SEQ擴增子建庫試劑盒。
張素芬女士同時表示“目標序列測序文庫製備通用試劑盒，經過嚴格的質量控制，完整的工藝改造放大，通過近3000例樣本的內部測試，建庫成功率達到99%以上，是真正的工業產品級建庫試劑盒。”
一直以來，卓越的產品品質是桐樹生物不變的宗旨與追求，桐樹人通過不斷努力與創新，以強大的研發實力，嚴格的生產工藝，完善的質量體系，為基因測序、分子病理診斷提供高品質的檢測試劑盒，以此滿足不同臨床、科研客戶的需求。
閱讀更多 轉化醫學網 的文章
