撰文 | 章臺柳
目前，腫瘤免疫療法主要聚焦在增強T細胞的細胞殺傷作用，ICB（immune checkpoint blockade）靶向抑制性通路，CAR-T靶向激活性通路。BiTEs（bispecific T cell engagers）是一種可以雙向特異性識別腫瘤抗原和CTL細胞受體（如CD3）的抗體，促使內源效應T細胞和腫瘤細胞相互作用，誘導T細胞活化，殺傷腫瘤細胞【1】。BiTEs促進T細胞/靶細胞結合並不依賴於MHC。CD3-CD19 BiTEs已成功用於治療CD19+ B-ALL【2】。和CAR-T療法一樣，BiTEs治療通常導致毒性，而且對於實體瘤的治療效果不佳。
NK細胞（natural killer）具有殺傷功能，促進抗腫瘤作用。NK細胞表達多種激活受體，如CD16、NKG2D、SLAM家族、NCR家族NKp30、NKp44和NKp46，是潛在的靶點用於誘導NK細胞介導抗腫瘤免疫。那麼靶向激活NK細胞的多功能抗體是否能提高抗腫瘤免疫，是否能改善毒性，目前還沒有報道。
近期，來自法國的Eric Vivier和Laurent Gauthier團隊在Cell上發表了題為Multifunctional Natural Killer Cell Engagers Targeting NKp46 Trigger Protective Tumor Immunity的文章，報道了靶向NK活化受體NKp46、CD16和腫瘤抗原的三功能nature killer cell engagers （NKCEs），可激活NK細胞，控制實體瘤和侵襲腫瘤的生長，並且具有類似於IgG抗體的藥代動力學，沒有脫靶效應。三功能的NKCEs為腫瘤治療提供了新的思路。
研究團隊首先檢測腫瘤中NK細胞的激活受體的表達情況，在人結腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、胰腺癌、胃癌等實體瘤中均出現NKp46+淋巴細胞。在急性髓系白血病、乳腺癌和肺癌中有報道NKp46持續性表達，並下調NKG2D、NKp30、NKp44等激活受體。同時，多種腫瘤中和外周血液中NKp46的表達沒有明顯差異，這使得NKp46可以作為靶點，用來激活腫瘤中NK細胞的抗腫瘤免疫。將可溶性人源NKp46-Fc作為抗原用於免疫小鼠，經篩選後產生和NKp46胞外段不同部分結合的14種anti-NKp46單抗。
其次，研究人員利用single-chain variable fragment（scFV）技術將anti-NKp46的Fab段和識別腫瘤抗原的部分相連製成bispecific NKCE。三種針對NKp46不同部位的NKCEs均能夠上調脫顆粒標誌物CD107、活化標誌物CD69，激活NK細胞，並促進裂解腫瘤細胞，效果優於腫瘤抗原單抗。經過進一步的優化設計，得到NKCE-1形式，不僅具有相當的NK激活能力及抗腫瘤效果，而且在體內具有IgG1類似的藥代動力學特性，和FcRn結合的高親和力，半衰期長達11天。隨後，研究人員製作了NKp46/(Fc)/CD20-NKCE-1，並使用CD20+ Raji lymphoma B細胞建立實體瘤模型檢測其抗腫瘤效果。NKp46/(Fc)/CD20-NKCE-1顯著降低實體瘤的生長速度，控制腫瘤大小；同時促進腫瘤中NK細胞的浸潤或者增殖。
最後，研究團隊將CD16介導的ADCC（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity）通路和NKp46進行聯合，製作能同時靶向NKp46、CD16、腫瘤抗原的三功能（trifunctional）NKCEs，進一步提升NKCEs的抗腫瘤能力。添加CD16後顯著增加NKCEs的腫瘤細胞裂解能力和NK細胞激活能力，同時優化CD16的Fc受體結合能力進一步提升NKCEs的抗腫瘤功能。活體實驗表明，bispecific NKCEs或trifunctional NKCEs用於治療實體瘤或者侵襲性腫瘤時，顯著降低腫瘤大小，控制腫瘤生長，而且三功能 NKCEs的抗腫瘤效果優於腫瘤抗原特異性單抗，具有潛在的臨床開發價值。
總之，受啟發於BiTEs技術，文章開發了針對NK細胞激活的多功能抗體技術NKCEs，同時靶向NKp46、CD16、腫瘤抗原，增加腫瘤中NK細胞數目，促進NK細胞激活和ADCC，提升抗腫瘤免疫。為開發下一代腫瘤免疫治療分子NKCE提供了重要參考。
原文鏈接：
https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.04.041
製版人：珂
參考文獻
1. Slaney, C.Y., Wang, P., Darcy, P.K. & Kershaw, M.H. CARs versus BiTEs: A Comparison between T Cell-Redirection Strategies for Cancer Treatment. Cancer Discov 8, 924-934 (2018).
2. Spiess, C., Zhai, Q. & Carter, P.J. Alternative molecular formats and therapeutic applications for bispecific antibodies. Mol Immunol 67, 95-106 (2015).
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