北京博奥龙：Quick CTL细胞免疫佐剂使用方法说明

细胞免疫疗法是疾病治疗的一大突破，相比免疫抑制剂（PD1/PDL1），它具有精准及个体化的特性，并且在肿瘤治疗中有其独特的优势。随着新技术及新靶点的研究探索，细胞疗法如CART、TIL及TCRT在长期难以攻破的各个异质性大的实体瘤中展现了很好的疗效。例如CAR-T（chimeric antigen receptor T cells）疗法从患者体内分离出免疫T细胞，并在体外对这些细胞进行基因改造，给它们装上识别癌细胞表面抗原的“嵌合抗原受体”（CAR）。随后，这些改造之后的细胞在实验室中经过大量扩增，再被输注回患者体内。它们就像是一支装备了最新武器，训练有素的军队，对癌细胞展开精准有效的攻击。细胞免疫研究的热度持续升温，目前，已有两种免疫细胞疗法在2017年获得美国FDA批准上市，即诺华的Kymriah，和Kite Pharmar的Yescarta，就此开启了肿瘤的免疫细胞治疗的新时代。国内目前尚无批准上市的细胞疗法，但2018年国家药品监督管理局（CNDA）批准明聚生物CAR-T产品JWCAR029的IND申请，这是国内首个获准临床的CD19靶向的CAR-T产品。

细胞免疫过程

在细胞免疫过程中，蛋白类抗原由抗原提呈细胞(APC）处理成多肽，它与MHC结合并移至APC表面，产生活化TCR信号；而抗原与T淋巴细胞表面的有关受体结合产生第二膜信号，协同刺激信号。在双信号刺激下，T淋巴细胞才能被激活，这就是Bretcher-Cohn双信号模式。T淋巴细胞被激活后转化为淋巴母细胞，并迅速增殖、分化，其中一部分在中途停下不再分化，成为记忆细胞；另一些细胞则成为致敏的淋巴细胞，其中细胞毒性T细胞（Cytotoxic T cells，Tc）有杀伤力，使外源细胞破裂而死亡。辅助性T细胞(helper T cells,TH,CD4 receptor）分泌白介素等细胞因子使Tc、 Mφ以及各种有吞噬能力的白细胞集中于外来细胞周围，将外来细胞彻底消灭。在这一反应即将结束时，抑制性T细胞(suppressor T Cells,Ts,CD8 receptor）开始发挥作用，抑制其他淋巴细胞的作用，终止免疫反应。记忆细胞不直接执行效应功能，留待再次遇到相同抗原刺激时，它将更迅速、更强烈地增殖分化为效应细胞，有少数记忆细胞再次分裂为记忆细胞，持久地执行特异性免疫功能。

不同于B细胞介导的体验免疫，主要由T细胞介导的细胞免疫主要参与对胞内寄生的病原微生物的免疫应答及对肿瘤细胞的免疫应答，参与迟发型变态反应和自身免疫病的形成，参与移植排斥反应及对体液免疫的调节。也可以说，在抗感染免疫中，细胞免疫既是抗感染免疫的主要力量，参与免疫防护；又是导致免疫病理的重要因素。

Quick CTL细胞免疫佐剂

在细胞免疫中，抗原特异性CD4+ TH1和CD8+ CTL细胞在胞内感染和肿瘤的发生发展过程中具有重要作用，因此成为相关疾病的免疫学研究和疫苗研发的重要内容。蛋白抗原（包括灭活病原微生物、肿瘤细胞裂解物、重组或提取的蛋白抗原、合成肽等）在氢氧化铝、油乳、脂质体等常规佐剂作用下不能有效诱生抗原特异性CD4+ TH1和CD8+ CTL反应。目前市面上很少有商品化的细胞免疫佐剂。北京博奥龙免疫技术有限公司，凭借二十多年的免疫佐剂研究经验，成功研制出一种具有自主知识产权、独特配方的新型水溶性细胞免疫佐剂-Quick CTL细胞免疫佐剂，能够作为蛋白抗原佐剂免疫小鼠诱生有效的抗原特异性CD4+ TH1和CD8+ CTL反应，为广大细胞免疫研究人员提供了新的选择，欢迎咨询。

附：Quick CTL细胞免疫佐剂-使用方法

1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍最终浓度（按每针次50μl用量配制）。备注：推荐使用的抗原用量为（1）免疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg；（2）亚单位蛋白抗原每针次1-10μg；（3）免疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg；（4）肿瘤细胞裂解物每针次10-100μg。

2. 37ºC水浴中解冻佐剂，充分混匀，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1混匀。

3. 通过后腿小腿肌肉或腹股沟皮下注射免疫小鼠，每只小鼠注射100μl。

4. 第7天按同样方式加强免疫1针。备注：每次免疫佐剂和抗原现配现用

5. 第14天通过ELISPOT、胞内细胞因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾脏或引流淋巴结中的抗原特异性CD4+ TH1和/或CD8+ CTL反应。

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