李斯特菌鉴定试剂盒
HiListeria™ Identification Kit
概况
该试剂盒为标准化的显色检测系统，通过李斯特菌特异性的动力学、糖发酵和生化反应进行鉴定。微生物的发酵反应，引起培养基颜色发生变化。
使用说明
待鉴定菌种应先进行分离和纯化。可在PALCAM琼脂（货号:M1064）或胰蛋白䏡琼脂（货号：M538）（含血或不含血）上挑取一个菌落，接种在５ml脑心浸膏肉汤（货号：M210）中，在35-37℃培养4-6小时， 直到在620nm处，接种液浊度≥1.0OD。
无菌打开试剂盒，撕掉封条。每孔接种50μl上述菌液。也可用接种环划线。在35℃-37℃孵育24-48小时。
结果判定
依据结果诠释表。在第2孔、第4孔和第5孔，在24-48小时孵育期结束后，分别添加如下试剂：
1）触酶试验：第1孔
用接种环刮取第1孔内表面，将接种环蘸到含3%H2O2的干净小试管中。
接种环表面冒泡为阳性。
接种环表面没有冒泡为阴性。
注意：3%的H2O2需新鲜配置。
2）硝酸盐还原试验：第2孔
加1-2滴对氨基苯磺酸（货号：R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（货号：R009）
立即出现粉红色为阳性
颜色无变化为阴性
3）七叶苷水解试验：第3孔
第3孔变为黑色，为阳性反应。
4）伏-普试验：第4孔
加3-4滴Barritt试剂A(货号：R029)和1-2滴Barritt试剂B（货号：R030）
10分钟内出现粉红色为阳性
无颜色变化或有轻微变化为阴性。
5）甲基红试验：第5孔
加1-2滴甲基红试剂（货号：I007）
试剂保持红色为阳性
试剂脱色变黄为阴性
6）糖发酵试验：第6孔-第12孔
酸产生导致培养基颜色由红变黄，为阳性反应。
如果仍保持红色，则为阴性。
12种生化反应
鉴定的李斯特菌物种
格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）
单核细胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes）
英诺克李斯特菌（Listeria innocua）
斯氏李斯特氏菌（Listeria seeligeri）
伊氏李斯特氏菌伊氏亚种（Listeriaivannovii Sub sp. ivannovii）
伊氏李斯特菌伦敦亚种（Listeriaivannovii Sub sp. londoniesis）
威氏李斯特氏菌（Listeria welshimeri）
储存条件及保质期
2℃-8℃；12个月
引用文献
A.K.Biswas, etal. Microbial profiles of frozen trimmings and silver sides prepared at Indianbuffalo meat packing plants. Meat Science. 2008,80(2): 418-422
AmirMasoud Shahbazi，et al. Comparativecontamination of Listeria monocytogenes in traditional dairy products inEsfahan Province, Iran. African Journal of Microbiology Research.2013, 7(16):1522-1526
NikiKharel,et al. Microbiological assessment of ethnic street foods of theHimalayas.Journal of Ethnic Foods.2016,3(3):235-241
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