【微生物】論壇熱帖!常見培養基質量控制問題彙總!

【微生物】論壇熱帖!常見培養基質量控制問題彙總!

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你是不是有很多關於培養基的問題,有時又找不到相應的解決方法,今天小析姐整理了一些問題的解決辦法和大家分享一下!


1. 滅菌後的培養基是否都要測pH值?如何測定pH值?

答:每個製備批次的培養基都應測定pH,可採用pH試紙或pH計測量。


2.含瓊脂培養基冷卻至25℃後已凝固,如何測定其pH?

答:有專門的固體培養基pH計,如Radiometer A /S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。


3. 稀釋液滅菌後pH值是否有變化?有何影響?(如pH7.0氯化鈉-蛋白腖緩衝液,pH6.8無菌磷酸鹽緩衝液)

答:一般pH有下降現象,約0.2左右,不同培養基pH變化可能不同。

4. 孟加拉培養基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進行培養黴菌和酵母菌?

答:根據中國藥典,採用玫瑰紅鈉瓊脂。

5. 配製pH值7.0氯化鈉-蛋白腖緩衝液時有時因為高壓滅菌器滅菌過程溫度過高而導致培養基混濁了,這種情況緩衝液還能用嗎?

答:建議按正常溫度滅菌,混濁培養基建議不要使用。


6.含瓊脂培養基在冷藏中形成冰晶怎麼處理?銷燬還是加熱再用?

答:建議不要使用。


7.融化的培養基為什麼不能再冷水中冷卻?

答:防止受熱不均引起結塊。


8. 滅菌後,滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開,這段時間是否會造成過度滅菌。

答:自然冷卻過程已經計算在正常滅菌時間內了,不會造成過度滅菌。


9. 培養基所用器具若使用溼熱滅菌,是否必須待乾燥後才可以使用?若烘乾或其它方法,中間過程怎樣防止微生物汙染?

答:如果是馬上使用且不是用於非水溶性供試液的製備及實驗,不一定要烘乾;否則,應乾燥後使用,滅菌及乾燥儘量在同一鍋裡進行,或用紗布和牛皮紙包紮緊密。


10. 培養基的避光儲存,是否配置好的培養基其全部放避光儲存?

答:最好都避光保存。無條件時,光敏感的培養基一定要。

11. 商品培養基幹粉說是加蒸餾水溶解,實際操作是否可以用純化水或注射用水?

答:只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質的水均可。

12. 培養基及器具滅菌可否同一設備同滅菌時間進行滅菌?

答:最好分開滅菌,條件不允許時可同爐滅菌,前提是都是潔淨無汙染的。


13. 培養基的保溫能否用60℃的培養箱,它與45℃—55℃水浴鍋保溫方法有何不同?

答:可以用恆溫培養箱保溫,但保溫溫度一般是50℃左右,且時間不能過長,一般是不超過4小時。


14. 培養基的貯存是否需要放置於2—10℃冰箱內?

答:需冷藏保存的培養基外包裝上會寫明。

15. 培養基滅菌後成份會有所蒸發減少,如何處理這個問題?

答:正常情況下蒸發量較少,可忽略不計。

16. 培養基融化後出現渾濁是有哪些方面的原因引起的?應如何避免?

答:可能的情況有:

1. 培養基配置用水不符合規定;

2. 滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢;

3. 培養基儲存不當;

4.融化時沸騰時間較長等。

17. 準備好的培養基有效期如何驗證?

答:定期取出培養基驗證其無菌性,促生長能力等方面。

18. 培養基配製好滅菌後,在高壓容器中保溫降至50℃左右,可不可行?

答:建議最好不要,避免過度受熱。


19. 脫水培養基對溼度是否有要求?多少適宜?

答:按要求室溫乾燥環境儲存即可。

20. 培養基pH值測定溫度在25℃,這個溫度應怎麼控制?比如固體培養基,固體培養基使用過程中還能調節pH值嗎?

答:可水浴控制培養基溫度。


21. 配製培養基過程中,按說明書稱定量,加規定的純化水,煮沸溶解,為了避免煮沸過程總減少水分,是否要在配製過程適當增加水?比如陪硫乙醇酸鹽流體培養基.

答:可適量增加,自己掌握。

22. 商品培養基一定要當天配當天用嗎?可否在一週內用完?

答:不是即配即用的培養基的話,儲存的當,可以使用。

23. 稱量培養基時,注意不要吸入粉末,這粉末是指何物?

答:就是你所稱量的乾粉培養基 ,因為培養基的粉末對呼吸道有刺激作用,而且培養基中的某些成分,如亞硒酸鹽、疊氮化鈉、乙酰胺等,長期吸入並在體內累積到一定量會對人體健康有危害。所以培養基配製稱量需做好個人防護,且最好選擇少粉塵環保型顆粒培養基。


24. 煮培養基,用不鏽鋼鍋在電磁爐上煮可行?硫乙醇培養基是否要煮沸?如何煮沸?用不鏽鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎?可不可以水浴煮沸呢?

答:硫乙醇應煮沸,量大時,我實驗室用不鏽鋼鍋在電磁爐上煮沸。不建議水浴煮沸,因為水浴煮沸瓊脂粉很難溶,導致瓊脂分裝不均勻,前段分裝的瓊脂含量少,後段分裝的瓊脂含量高,導致有的管或瓶中的FT凝固。


25. 如培養基在高壓滅菌器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎?

答:高溫滅菌器有安全閥,溫度下降到安全閥可打開時將培養基取出室溫冷卻,各型號滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。


26.平板塗布和平板劃線培養基表面水分過多,菌落蔓延如何解決?

對於採用表面接種形式培養的固體培養基,應先對瓊脂表面進行乾燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣於烘箱或培養箱中(溫度設為25℃~50℃);或放在有對流的無菌淨化臺中,直到培養基表面的水滴消失為止。注意不要過度乾燥。商品化的平板瓊脂培養基應按照廠商提供的說明使用。


(內容來源:食品夥伴網 網絡 由小析姐整理編輯)


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