使用STEMCELL的产品生产嵌合抗原受体（Chimeric Antigen Receptor, CAR）T细胞的集成工作流程。
EasySep™ Release CD3正选试剂盒
使用无柱免疫磁珠分选，从新鲜或冻存的外周血单个核细胞（PBMCs）或经洗涤的白细胞单采术样本中分离出纯度高达99%的CD3+细胞。在30分钟内获得的不带磁珠的CD3+细胞，具活性和功能性，并可立即用于下游应用。
图1. 使用EasySep™ Release人CD3正选试剂盒分离高纯度的T细胞。
起始样本为人PBMC，通过人EasySep™ Release CD3正选试剂盒（产品号 #17751）进行分选，分选后的组分中CD3+细胞含量通常可达98.7±0.9%（平均值±标准差，使用EasySep™紫色磁极）。
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ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞激活剂
ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂
在不使用磁珠、饲养层细胞或抗原的情况下，这种可识别和交联CD3及共刺激分子的可溶性抗体复合物能强化人T细胞的激活和扩增效果。这些激活剂提供的温和刺激能维持细胞的高活性，并无需独家授权用于T细胞免疫疗法的制备。
图2. T细胞在经过ImmunoCult™人CD3/CD28或CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂刺激后被活化。
通过EasySep™分选的T细胞使用添加了人ImmunoCult™ CD3/CD28 T细胞激活剂（产品号 #10971）或人ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂（产品号#10970）的ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基（产品号 #10981）在第0天开始培养。以CD4+ T细胞和CD8+ T细胞设门，并通过CD25+在第0天和第3天的表达评估T细胞的活化程度。培养开始时的CD25+细胞群含量为（A）5.63±2.4%（平均值±标准差）。经三天活化后，以人ImmunoCult™ CD3/CD28 T细胞激活剂和人ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T激活剂活化的CD25+细胞群含量分别为（B）75.4±13.8%和（C）88.8±3.2%（平均值±标准差）。
图3. 使用ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂活化的T细胞呈现被活化的形态。
分别使用（A）可溶性人ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂和（B）基于磁珠的激活竞品试剂对通过EasySep™分选的T细胞进行激活后的图像。
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ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基
为无血清和无异种成分的扩增培养基，使T细胞获得一致性的扩增效果。这种无需血清补充的培养基，能够强化T细胞的扩增，其扩增水平与含血清的培养基相当，且消除了性能的差异。
图4. 使用添加了ImmunoCult™ T细胞激活剂的ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基进行培养时，T细胞表现出强劲的扩增能力和高活率。
将T细胞在添加了人Immunocult™ CD3/CD28 T细胞激活剂、人ImmunoCult™CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂或基于磁珠的激活竞品试剂的Immunocult™-XF T细胞扩增培养基（含rhIL-2）中扩增超过14天。在第0天至第14天测定其扩增倍数及活率。（请注意，扩增过程中T细胞未被重新活化）。
图5. 相比于其他无血清及血清补充成分的培养基而言，ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基有更强的T细胞扩增能力。
T细胞被人ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂活化，并培养在（A）Immunocult™-XF T细胞扩增培养基或无血清的竞品培养基（含rhIL-2，每个供体三个重复），或（B）Immunocult™-XF T细胞扩增培养基或含血清补充成分的竞品培养基（含rhIL-2，每个供体三个重复）中。在培养期间的第0天以及每7至8天，使用人ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂对T细胞进行刺激。相对于初始接种密度，在第21天分析T细胞的扩增倍数。（A）与所有测试的无血清竞品培养基相比，ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基显示出对总T细胞更显著的扩增能力。竞品1到6代表无血清的竞品培养基。每一列误差线代表平均值±标准差（ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基与其他所有无血清的培养基的对比中，P＜5x10e-13，通过线性混合效应模型与线性回归方法进行测试，n=4至19个供体）。（B）与所有测试的含血清补充成分的竞品培养基相比，ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基显示出对总T细胞相似或更显著的扩增能力。竞品1到4代表含血清补充成分的竞品培养基。每一列误差线代表平均值±标准差（ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基与其他所有含血清补充成分的培养基的对比中，P＜0.0006，但竞品4除外，通过线性混合效应模型与线性回归方法进行测试，n=1至19个供体）。
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完善您的T细胞工作流程
人T细胞分选试剂盒
分离特定的人T细胞亚群或Pan T细胞用于您的T细胞治疗研究。一系列正选、负选的细胞分选试剂盒可供选择。
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CryoStor® CS10冻存液
将人T细胞保存在无血清、无动物源成分的、含10%二甲基亚砜（DMSO）的冻存液中。采用USP组分，cGMP制造的CryoStor® CS10在冷冻、储存及解冻过程中为细胞提供了一个保护性环境。
目前CryoStor® CS10已被FDA批准用于CAR-T临床研究中1！
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免费的Nature Protocols挂图，总结了用于治疗的CAR-T细胞生成所涉及的过程。
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免疫学专题：CAR-T细胞
讲述了我们在CAR-T细胞治疗研究领域的重要进展。
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