06.15 HIV檢測方法

目前國際上HIV抗體常規篩查的主流試劑是以雙抗原夾心法為原理的第三代試劑，它與第1、2代HIV診斷試劑不同，可同時檢測所有類型抗體，提高了試劑的敏感性，同時特異性也得到了提高，且比第2代試劑對HIV感染的檢測平均提高5天。第4代HIV診斷試劑是將HIV抗原和抗HlV-1 p24抗體同時包被載體，可同時檢測樣本中的HIV-1 p24抗原和Hlv抗體，因此該類試劑可以檢出HIV-1 p24抗原陽性但抗體還未陽轉的HIV感染的“窗口期”樣本，從理論上講，第四代試劑檢出Hlv感染的時間要早於第三代試劑。國外有文獻報道第4代HIV試劑可進一步將“窗口期”縮短4~5天。

第一代試劑

使用HIV全病毒裂解物為抗原，應用間接法原理檢測HIV抗體。如日本富士公司生產的HIV-PA試劑。

第二代試劑

使用在細菌或真菌中表達的人工重組或化學合成多肽HIV抗原，應用間接法原理檢測HIV抗體。基因重組通常易於在培養基中生產大量同源性抗原，產品為單一目的基因而非多樣性抗原混合，特異性高於第一代試劑。

第三代試劑

使用合成多肽HIV抗原（少數用重組抗原），應用雙抗原（或雙抗體）夾心法原理檢測HIV抗體（或抗原）。由於標記HIV抗原可同時檢測血清中HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗體，此類試劑的敏感性和特異性均優於標記抗人免疫球蛋白的間接法。

第四代試劑

此類試劑在第三代試劑盒基礎上，將針對P24抗原的抗體與HIV-1抗原一起包被固相載體，可同時檢測HIV-1 IgG、IgM、IgA抗體和P24抗原。

檢測方法

A．醫療衛生部門常用的檢測方法：

1、 酶聯免疫吸附法（ELISA）：通常用於初篩，便宜，大多采取血液檢測，也有使用唾液和尿液的，實際檢測通常需要三到四個小時，結果分為“陽性”或“陰性”。其準確度高達99.5%，但敏感性高於特異性——這意味著在極少數檢測的結果是不準確的，而其中假陰性又是極其罕見的。這又意味著：只要確實過了窗口期，而且操作正確，陰性的檢測結果是十分可信的。由於ELISA的敏感性高於特異性，其他病原體的感染或者操作的不規範也會造成陽性的結果——稱為“假陽性”。所以陽性的初篩結果需要用同樣的樣本進行重新檢測，或者用其他方法進行確診。

2、快速檢測法：對血液或口腔黏膜進行取樣，檢測HIV抗體，20-40分鐘即可得出跟ELISA一樣十分準確的結果。在試劑可靠操作規範的情況下，其錯誤率僅為千分之一至千分之三。（注意：不要因此以為唾液、接吻、共用餐具就可傳播HIV）。跟ELISA一樣，快速檢測的結果如果呈陽性，也需要進行確診檢測。

3、免疫印跡法（Western Blot）：只用於對初篩呈陽性的案例進行確診檢測，有三種結果，“陽性”，“陰性”和“不確定”。“不確定“通常發生在受測者的身體剛剛對病毒產生免疫反應的時候。在免疫印跡法的結果中，假陽性是極其罕見的。

4、間接熒光抗體試驗（IFA）：也用於對初篩呈陽性的案例進行確診檢測，但不是很常見。其方法是用顯微鏡來找到血液中的HIV抗體。

B．抗原檢測：抗原是入侵病原體攜帶的某種能激發人體產生抗體的物質。HIV攜帶的抗原通常是P24蛋白。在感染初期，它們在血液中的含量會急劇上升從而能被檢測到。但HIV病毒在人體裡安家落戶之後它又檢測不到了。所以這種方法常跟抗體檢測一起用於捐獻血液的HIV檢測。

C．聚合酶鏈反應檢測（PCR）：核酸擴增試驗指的是釋放基因物質並用聚合酶鏈反應檢測。PCR用於直接檢測HIV的核酸物質，在感染兩至三週內就能從血液中檢測出HIV病毒。這種方法還可以用於測試血液中的病毒含量，為治療提供依據。但是它既昂貴又複雜。

這對檢測者來說意味著：

在試劑可靠、確定已過窗口期的情況下，初篩的陰性結果（ELISA和快速檢測法都算）是十分可靠的。一次檢測就已足夠。初篩的陽性結果需要通過確診檢測來排除假陽性，確診結果也是十分可靠的。

有條件的受測者可以選擇C、D兩種方式進行檢測，以求更準確，更及時地瞭解自身狀況，但這昂貴且不易獲得。而且最終確診感染仍需通過抗體檢測。

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