脱细胞猪膀胱支架的构建

摘要:

文题释义:

脱细胞:生物移植或修补材料制备过程中常用到脱细胞方法,脱细胞能很好的保留组织的成分,降低移植或修补后的免疫原性,同时保持良好的机械性能,在临床上得到较为广泛的应用。

猪膀胱支架:利用不同的脱细胞方法去除猪膀胱组织中的细胞后制备为猪膀胱支架,既保留了细胞外基质的完整性,又可以降低移植后排斥反应,为进一步的对组织工程支架材料的研究奠定了可行的基础。

背景:膀胱修补术是目前临床上治疗膀胱缺损的主要方法之一,同源性组织因各种因素的影响来源较少,组织工程膀胱脱细胞基质受到人们越来越多的关注。猪膀胱脱细胞外基质来源广泛,具备天然的细胞外支架结构,成为组织工程膀胱替代材料研究的热点。

目的:研究脱细胞猪膀胱作为组织工程支架材料的可行性。

方法:取新鲜的猪膀胱,联合液氮冻融、十二烷基硫酸钠、胰蛋白酶脱细胞方法制猪膀胱无细胞基质。按不同脱细胞方法分组:①正常对照组:不做任何处理;②实验组:0.6%胰蛋白酶+5%十二烷基硫酸钠(pH 8.0);③脱细胞对照组:分别用0.75%胰蛋白酶(pH 8.0)、1%胰蛋白酶(pH 8.0)、5%十二烷基硫酸钠(pH 7.6)或10%十二烷基硫酸钠(pH 7.6)处理。通过苏木精-伊红染色和VG染色、DNA定量、α-Gal抗原检测,观察猪膀胱脱细胞效果。

结果与结论:苏木精-伊红染色显示实验组猪膀胱细胞成分已基本去除;VG染色显示实验组完整保留了猪膀胱组织的细胞外基质成分;实验组的DNA残留量仅为(49.84±30.13) μg/g,显著低于几个脱细胞对照组(P < 0.05);同时其α-Gal抗原残留也明显低于脱细胞对照组。提示:应用0.6%胰蛋白酶+5%十二烷基硫酸钠处理猪膀胱,在完整保留猪膀胱组织细胞外基质的同时,可有效去除其细胞成分,为构建脱细胞猪膀胱支架提供一定参考价值。

ORCID: 0000-0003-1004-7390(李芹)

中国组织工程研究杂志出版内容重点:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程

关键词: 猪膀胱, 生物支架材料, 脱细胞, 十二烷基硫酸钠, 胰蛋白酶

文章来源: 李 芹, 夏翠萍, 刘晓红, 徐志云, 龚德军, 吴 昊. 脱细胞猪膀胱支架的构建[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(4): 572-576.