進口大豆「轉基因」檢測的原理和方法

中國2017年進口了9550多萬噸轉基因大豆,原則上這些大豆只能用於加工原料或飼料,但也不排除這些大豆混入到食品豆中。轉基因大豆主要是抗草甘膦的,其原理在於轉入抗除草劑基因,使得大豆產生抗性。當草甘膦大量噴撒在大豆上時,可以有效地殺死雜草,減少人工除草成本,但也會導致草甘膦殘留。目前,公眾對轉基因大豆的關心,除了轉基因本身,還有草甘膦殘留的問題。

進口大豆“轉基因”檢測的原理和方法

先進的轉基因CP4 EPSPS 快速檢測試紙。其原理是:EPSPS是除草劑草甘膦的靶標酶,來自根癌農桿菌CP4菌株的EPSPS對高濃度的草甘膦表現出非常強的抗性,所以被廣泛用於多種作物(包括大豆、玉米、油菜、棉花和甜菜等)的轉基因研究中。我們製備的CP4-EPSPS單克隆抗體可特異識別轉基因植物中的目標蛋白質。

進口大豆“轉基因”檢測的原理和方法

【產品簡介】

本產品用於快速檢測植物穀物散糧等樣品中的轉基因CP4EPSPS,靈敏度為0.2%,整個檢測過程只需要10分鐘,適用於各類企業及檢測機構。

【檢測原理】

轉基因CP4 EPSPS 快速檢測試紙應用雙抗體夾心免疫層析的原理,樣本中的抗原在側向移動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體 1結合,形成抗原-抗體複合物,繼續向前方流動和 NC膜檢測線上特異性單克隆抗體 2結合形成雙抗體夾心複合物,如果樣本中轉基因穀物散糧的數量大於 0.2%,檢測線顯紅色,結果為陽性;反之檢測線不顯色,結果為陰性。

【產品組成】

轉基因CP4 EPSPS 速檢測試紙(50條/桶、2桶/盒);說明書(1份/盒);滴管(100個/包);樣品杯(100個/包)

【樣品處理】

提取穀物散糧:

1.取粉碎的穀物散糧15g,轉移到做好標記的容器中。注意:粉碎後的顆粒成咖啡渣大小即可。

2.加75ml提取緩衝液溶解。

3.蓋好容器的蓋子,用力上下震盪20~30s,確保樣品與提取緩衝液充分混勻。靜置等待固體物質沉澱分層。

4.請注意不要交叉汙染,每個樣品採用單獨的容器。

【使用步驟】

(1) 測試前請完整閱讀使用說明書,並將試紙恢復至常溫後取出。

(2) 從包裝桶中取出試紙後請儘快使用。

(3) 用滴管取8滴(約200ul)上清加入樣品杯;

(4) 將試紙從試紙桶中取出,直接按箭頭方向插入樣品杯中,開始計時;

(5) 結果應在10-15分鐘讀取,其他時間判讀無效。

(6) 讀取結果時,試紙水平置於觀察者正面,如右圖所示。

【結果判斷】

陰性(—):T線不顯色;

陽性(+):T線顯色肉眼可見;

無效:未出現C線,可能操作不當或試紙已失效。在此情況下,應再次仔細閱讀說明書,並用新的試紙重新測試。

進口大豆“轉基因”檢測的原理和方法

【注意事項】

1. 請勿觸摸試紙中央的白色膜面;請勿使用過期的試紙。

2. 滴管請勿重複使用;

3. 自來水和天然水不能作為陰性對照,不能替代提取緩衝液。

4. 樣本中的固體雜質顆粒會導致假陰性結果,取樣時棄去肉眼可見的顆粒部分,有條件時請離心後取上清液做檢測。

進口大豆“轉基因”檢測的原理和方法


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