胰島素是體內已有的一種蛋白質類激素，它需要在正常體溫下發揮生物作用。因為它是一種蛋白質，遇高溫會變質凝固，失去生物活性，遇冰凍也會變質，影響療效，因此應用胰島素的糖尿病患者需要合理保存胰島素。
由於胰島素在體溫下發揮作用，因此在短期內室溫下它並不會變質，可以在室溫下穩定地保存1個月。但是，胰島素的保存需要避免環境溫度過高或過低，避免直接接觸陽光或其他熱源，避免冰凍。一般建議將胰島素保存在室溫不超過25℃的房間中。
對於未打開使用過的胰島素，不論是哪一種，都應當儲存在2℃～8℃之間，即冰箱的冷藏室中。注意，不要放到冷凍室內凍存，因為胰島素冷凍後，原來透明的液體會產生晶體或微粒，原來混濁的液體會形成較大的顆粒或塊狀物，這些解凍後仍殘留的顆粒會影響胰島素的吸收及劑量的準確性，因而即使解凍也不能再用。
對於已打開正在使用中的胰島素，要分清是胰島素筆的筆芯，還是用注射器抽吸的瓶裝胰島素。如是後者，由於瓶口有橡皮塞密閉，因此使用後可以放回冰箱的冷藏室中保存。如果是裝在胰島素筆中的筆芯，則使用後不能再放回到冷藏室中。
因為筆芯上有針頭，使瓶內胰島素與外界相通。當筆芯從冷藏室中取出時，由於溫度上升，使瓶內胰島素由針尖溢出，會影響劑量的準確性。
因此，胰島素筆芯可以放在陰涼乾燥的地方。將其放在一般空調室溫下（約25℃），正在使用中的胰島素筆芯一般一支用3－4個星期是安全的。有時胰島素筆在外出時放在口袋中，接近體溫，保存時間為4周左右。
糖尿病患者每次注射胰島素前，都要觀察其性狀。速效和長效胰島素類似物以及短效胰島素都是澄清無色的液體，看起來像水一樣，如果出現雲霧狀、變稠或變色，或是出現了固體顆粒，都不能繼續使用，中效胰島素、預混胰島素或預混胰島素類似物都是混濁的，在每次注射前必須混勻（混勻的藥液外觀應成均一的雲霧狀或牛奶狀），如果發現有沉澱、顆粒或團塊，都不要再繼續使用。
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