一周COVID-19重要研究:45分钟检测核酸的CRISPR技术

一周COVID-19重要研究:45分钟检测核酸的CRISPR技术


全世界范围内感染新冠病毒的COVID-19患者人数,本周累计已超过200万,并且这一数字的增加趋势依然不容乐观。充分认识新冠病毒的传播特征、快速诊断感染者,对于遏制疫情、防止再度爆发仍是重要任务。最新发表在《自然》子刊的两项相关研究引起了很多关注。今天的这篇文章里,学术经纬将向读者朋友们介绍这些前沿进展。


基于CRISPR的快速诊断技术


根据发表在《自然-生物技术》的一篇研究论文,加州大学旧金山分校(UCSF)和生物技术初创公司Mammoth Biosciences的科研团队开发出一种基于CRISPR技术的诊断工具,可以快速检测出患者体内是否有新冠病毒。


一周COVID-19重要研究:45分钟检测核酸的CRISPR技术


论文指出,使用这一技术大约只需45分钟就能给出结果,相比之下,目前基于PCR的核酸检测需要几小时甚至几天才能出结果,因此新技术可以大大缩短诊断时间。


而且,速度的提高看来并没有让准确性下降。临床样本的检测结果显示,这种新技术的表现与基于RT-PCR的核酸检测不相上下。研究人员用36名COVID-19患者和42名其他呼吸道疾病患者的临床样本进行了测试,阳性预测符合率为95%,阴性预测符合率为100%。


这种测试名为“新冠病毒的DNA内切酶靶向CRISPR反式报告系统”(简称DETECTR),基于CRISPR-Cas12系统。测试时先从患者呼吸道拭子取得样本,将病毒RNA逆转录为DNA,再通过一种名为等温扩增的技术进行扩增。之后,新冠病毒编码包膜蛋白(envelope)和核衣壳(nucleocapsid)的基因序列就可以被CRISPR–Cas12检测到。Cas12会切割确认病毒存在的报告分子。然后,使用者就能像做家用验孕测试一样,在可视化读出条上读取结果。


一周COVID-19重要研究:45分钟检测核酸的CRISPR技术


除了加快速度外,操作简便将是这种新测试方法的另一个优势。基于PCR的检测需要使用专门的设备、进行冷热循环。而DETECTR只有两个固定的操作温度,研究人员说,几乎可以在任何实验室使用现成的化学试剂和通用设备进行测试。


如果可以通过FDA测试,研究人员表示希望可以在进一步优化调整之后,将这种诊断技术用于机场、学校、小型诊所等场所。


出现症状前是重要的传播时间点


《自然-医学》在线发表的一篇简要通讯文章,重点关注了新冠病毒感染者在潜伏期内排出病毒的特点。

一周COVID-19重要研究:45分钟检测核酸的CRISPR技术


这项研究来自香港大学的世卫传染病流行病学及控制合作中心。科学家们对94名新冠疾病患者的病毒排出时间模式进行了调查。他们一共分析了414份咽拭子样本,时间跨度从最开始出现症状,一直到症状出现的32天。研究分析发现,患者的病毒载量在其症状刚出现的时候最高。


他们还分析了77个“传播对”,每对包含两名在流行病学上具有清晰关系的患者,病毒很有可能从其中一人传播到另一人身上。分析表明,两者发病的平均间隔为5.8天,中位间隔为5.2天。如果参考另一项已经发表的研究里,病毒的平均潜伏期为5.2天的数据,可以推断在症状出现的2~3天前,就可以出现感染。感染的峰值为症状出现前的0.7天。
此外,他们也估计44%(95%置信区间25-69%)的继发病例是在症状出现前的阶段被感染的。


一周COVID-19重要研究:45分钟检测核酸的CRISPR技术

▲新冠病毒的传播特点不同于SARS病毒和季节性流感(图片来源:参考资料[1])


作者们也指出研究的一些不足,譬如症状的出发情况依赖于患者的回忆。考虑到存在初发症状认知滞后的现象,这可能会引入偏差。


在文章的摘要最后,研究作者指出,在疾病控制上,要注意出现症状前的感染现象。


[1] James Broughton et al., (2020) CRISPR–Cas12-based detection of SARS-CoV-2. Nature Biotechnology. DOI: 10.1038/s41587-020-0513-4

[2] Xi He et al., (2020) Temporal dynamics in viral shedding and transmissibility of COVID-19. DOI: 10.1038/s41591-020-0869-5



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