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导读：今日，全国新冠病毒累计确诊66576例，仍有疑似8969例。新冠肺炎庞大的潜在感染基数，要求临床快速诊断和公共区域人员筛查工作准确迅速、严丝合缝，这也将是过滤新冠肺炎感染源、彻底阻断病毒传播的重要防线。然而，目前仍受限于检测试剂盒的数目和灵敏度、仪器的可移动性等因素，无法对所有人进行核酸检测和病毒排查。
CRISPR-Cas9基因编辑技术发明者，张锋团队，联合哈佛、MIT和霍华德休斯医学院等一众顶级研究机构，推出了一款基于CRISPR技术的新冠病毒核酸检测试纸，并公开了这项诊断技术的操作步骤。该技术目前正在寻求有足够新冠肺炎病例数的合作机构，展开大规模临床试验，以期尽早将其推向应用一线。
这种诊断手段基于该团队2019年9月在Nature Protocol发表的基于CRISPR系统的SHERLOCK技术（specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking），缩写与大侦探夏洛克·福尔摩斯同名，旨在明察秋毫，迅速准确地检测出微量目标核酸。
其原理是：由“锯子”核酸内切酶Cas13，与病毒核酸互补先导RNA序列“探头”形成检测复合体，当复合体中的“探头”检测并结合目标病毒RNA后，“锯子”Cas13酶即被激活，能够“锯断”任何其他RNA。研究者设计了一种尾部拖有RNA的荧光蛋白，只有当其报告基团RNA被切断时才会发光。于是，一旦Cas13酶复合体被互补序列激活，就能使原本沉默的荧光蛋白发光，从而报告病毒核酸的存在。
SHERLOCK核酸检测技术原理
此次的诊断工具中包含了专门识别新冠病毒壳蛋白S基因和开放阅读框Ｏrf1ab基因互补片段，并且被综合简化为类似“验孕棒”的可视化试纸。只要将试纸浸入初步纯化过的核酸样本中2-3分钟，即以试纸上黑线的出现确定新冠病毒核酸的存在。试纸可检出10-100拷贝数/微升的低浓度核酸，灵敏度极高。
基于CRISPR系统的核酸检测试纸结果
病毒核酸样本的初步纯化方法与目前使用的qPCR的准备步骤相同。
实验总共分为三步：1. 将RNA样本42摄氏度等温扩增25分钟。
2. 将Cas13核酸内切酶、先导RNA加入步骤1样本中37摄氏度孵育30分钟。
3. 将检测试纸浸入步骤2溶液中，5分钟内显示结果。
这项基于基因编辑工具CRISPR系统的技术，无需依赖大型仪器，可移动性强，灵敏度高，操作简便，结果可视化，真正做到立等可取。目前，该技术还未得到足够的临床样本检验，无法直接投向临床，但其中的质粒、操作流程等信息已被全部公开，欢迎世界各地研究机构的尝试和检验。如果这项技术能真正进入一线，那么筛查范围更广，所需人力物力资源大幅减少，那么人类有望更快拿下抗“疫”攻坚战的胜利！
基于CRISPR的病毒诊断技术支持邮箱：
操作流程：
https://static1.squarespace.com/static/5b7c640be2ccd1703a3da4d3/t/5e46d16cf617da2f796f926e/1581699437272/COVID-19+detection+%28v20200214%29.pdf
参考文献：
https://mcgovern.mit.edu/2020/02/14/enabling-coronavirus-detection-using-crispr-cas13-an-open-access-sherlock-research-protocol/
Max J. Kellner, et al. SHERLOCK: nucleic acid detection with CRISPR nucleases. 23 Sep, 2019.
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