要注意!病毒“逃过”核酸检测,是变异了吗?

在关注这次新冠肺炎疫情的民众心中,新冠病毒实在是“非常狡猾”,不但它的传播方式不断更新,从最初的飞沫传播演变到接触传播、粪-口传播乃至气溶胶传播,而且最近还出现三次核酸检测均为阴性、最终却确诊为新冠肺炎的患者。这是否说明新冠病毒正在快速变异以适应人体环境呢?

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■现在核酸检测试剂还不完善

武汉大学医学部病毒研究所教授杨占秋表示,从目前的情况看,新冠病毒传播方式的不断更新,跟它的变异没有关系,而是我们对这种全新病毒的认识不断加深的结果。通常而言,病毒不可能这么快就产生变异,不管是武汉、北京还是上海,目前收集到的病毒样本都是相同的,还没有出现变异的情况。

那么为什么会出现核酸检测呈阴性的确诊患者呢?北京大学人民医院呼吸内科主任高占成在国务院联防联控机制新闻发布会上表示,任何病毒的核酸检测检出率都不可能是百分之百,对新型冠状病毒的核酸检测也不例外,它检出假阴性也是在所难免,同时检测检出率的结果也和患者本身病情轻重程度、疾病发展的不同阶段、取样采样的方式方法和实验室自身的检测条件等等多种因素相关。

杨占秋表示,现在核酸检测试剂还不完善,没有把所有情况都包括进去。另外,核酸检测需在病人体内排毒的情况下才能查出病毒。新冠病毒的潜伏期是2-14天,在这段时间内,如果病人体内还没有排毒或已经排过毒了,在这些情况下是查不出来的。此外,当前核酸检测的标本采集也存在局限。例如常用的鼻咽拭子检测的准确性低。因为新冠肺炎的病变主要发生在肺部,即下呼吸道,有时会出现上呼吸道咽喉部找不到病原的情况。

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■检测三次都做不出来怎么办?

对于有病例出现三次咽拭子检测均为阴性、通过下呼吸道样本才确诊为新冠肺炎的情况,北京佑安医院感染综合科主任梁连春解释:“这跟采集标本的方式方法有关系,也跟患者所处的疾病阶段有关。新冠肺炎的患者一部分是筛查出来的,比如某患者的亲戚、同事得了这个病,他是密切接触者、疑似病例,来做了核酸检测,他可能是阳性的,但是没有临床表现,一段时间之后大部分病人会出现症状,但很少部分没有症状,属于隐性感染者。同时,跟试剂盒的敏感度也有关系。有的患者发病确实非常早,就是采不出来。在发病过程中,采集肺部的深度痰液标准,能提高一部分准确性。”

类似上述情况,确实给临床诊治带来了一定困难。“对此,我们会采取相应的方法去化解,比如详细询问流行病学史,并根据临床表现和影响表现,综合去判断是不是新冠肺炎。”梁连春说,治疗之后,按照国家卫健委发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》的出院标准,体温恢复正常三天以上,呼吸道症状明显好转,肺部影像学显示炎症明显吸收,连续两次呼吸道病原核酸检测阴性(采样时间间隔至少1天),可解除隔离出院或根据病情转至相应科室治疗其他疾病。梁连春说,像这样的情况在前期基本上能找出流行病学史。

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■CT与核酸检测哪个更靠谱?

近日,针对有人提出“用CT代替核酸检测诊断新冠肺炎”的观点,国家医疗专家组成员、北京大学第一医院感染疾病科主任王贵强说:“CT是一种肺炎疾病诊断的影像学方法,而核酸检测是新型冠状病毒的病源学诊断方法,二者不能互相取代。尽管核酸检测有假阴性的问题,但这样病人的传染性也小,因为上呼吸道没有检测到,提示传染性不强。”

王贵强介绍,而影像学诊断包括CT和胸部X光片,对肺炎的诊断来讲,是很有价值的,可以看出肺部是否有炎症。但新型冠状病毒肺炎也是病毒性肺炎的一种,其影像学表现与很多其他病毒性肺炎,如流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒感染等表现比较类似,很难做鉴别性诊断,即不能区分到底是一般病毒性肺炎还是新型冠状病毒肺炎。

浙江大学附属第二医院放射科主任医师张敏鸣也认为,CT特别容易产生交叉感染,必须要采取完全封闭的单独器具,不光是机器消毒,还有工作人员的所有装备。因此,从卫生经济学角度讲,可操作性不强,需要分地区考虑。

而徐州医科大学教授顾兵直言,CT不能区分患者到底是感染哪种病毒,而核酸检测则可以批量甄别出到底是哪种病毒感染的,病原学证据在感染性疾病的诊断中发挥重要作用。只有影像学与实验室检查并重,才更有利于诊断,更有利于疫情的防控。

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■链接|探密核酸检测

在关于新型冠状病毒感染的肺炎疫情报道中,我们熟悉了“核酸检测”这个术语。那么,核酸检测如何进行?

首先检测核酸需要医疗机构是三级甲等医院,实验室系二级生物安全实验室且具有三级生物安全防护设施,PCR实验室通过省卫健委技术验收和特定的人员资质。

PCR实验室又称为基因扩增实验室,利用分子生物学技术,检测人体内部的病毒含量,此种试验准确可靠,敏感度高,是新冠肺炎诊断的重要依据。实验室一般保证环境温度18℃~25℃,相对湿度40%~60%,根据实验流程,PCR实验室分样品准备区,标本制备区,基因增扩区,产物分析区等几个区域。对样本的采集、运输、处理都有严格的要求。

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验室里的三级生物安全防护包括穿着两层防护服,戴N95口罩、护目镜、面罩、乳胶手套、防水靴套等,25℃恒温下连续工作8个小时,病毒核酸检测者们已经浑身被汗水湿透。

核酸提取、体系配制、扩增检测……看起来每个有条不紊的操作程序背后,都是危险和希望并存。核酸检测时,痰标本要开盖进行细菌培养,震荡和高速离心处理过程中会产生大量气溶胶,危险无处不在,一旦操作不慎就会被感染。

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▲专门的样本运送箱,恒温、三层防护,箱子的位置和运动轨迹,可通过GPS定位系统全程在线监控。


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▲隔离要求严格,一定要保证样本不受污染,也不外泄。一般来说,要达到这个标准,需要的作业空间也不小。


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▲样本制备室(接收标本和核酸提取),因为要接触样本,这是整个实验室最危险的地方,实施三级防护——最高防护的操作间。在这里,提取样本中的病毒核酸。实验室配备了多台半自动核酸提取仪、一台全自动核酸提取和扩增平台。


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▲实验室有严格的防护工作流程,穿脱防护服也有严格的流程。工作人员进入实验室后全部操作完毕才能出实验室,期间禁食禁水,不上厕所。


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▲制备好的样本,在这里由机器进行基因扩增和并和阳性对照、阴性对照比较,“判读”病毒基因是否存在。


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▲就是这台机器(实时荧光定量PCR扩增仪)自动检测,一次可以处理96份样本,每批核酸扩增耗时约一个半小时。每天从上午8点开始,一批一批做,直到做完当天的所有样本。有一天,做到凌晨3点。


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▲检测完,所有样本和耗材密封投入这里,专业消毒。


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▲再运送到这里,高压和120摄氏度高温30分钟灭活,可以杀死所有病毒和细菌,成为处理好的医用垃圾,由专业公司上门收取、集中处理。

(来源:新华网 朱青 徐海涛 黄博涵/文、人民网、《科技日报》付丽丽/文、《环球时报》蒋若静/文、环球网)


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