兩種剪切體在小鼠腦中的差異表達

膠質細胞源性神經營養因子(GDNF)在神經元存活和功能中起重要作用,有α-pro-GDNF和β-pro-GDNF兩種剪切體。這兩種剪切體對多巴胺神經元具有重要的保護作用。但是,目前仍然缺乏GDNF剪接體在富含多巴胺能神經元的腦區中表達的研究。

中國徐州醫科大學顧笑赫等在其一項最新研究中成功設計並製備了GDNF剪接體的特異性引物,隨後進行實時熒光定量PCR檢測發現,小鼠腦組織β-pro-GDNF的mRNA表達顯著強於α-pro-GDNF的mRNA表達。為了評估小鼠腦組織中α-和β-pro-GDNF的蛋白表達,進行了免疫印跡檢測。結果顯示,β-pro-GDNF的蛋白表達顯著低於α-pro-GDNF的蛋白表達,與mRNA表達結果相反。為了探索GDNF剪接體轉錄和翻譯水平反向表達的可能原因,用實時熒光定量PCR分析了GDNF剪接體與分選蛋白相關受體A(SorLA)mRNA表達的關係發現,小鼠腦中SorLA mRNA與β-pro-GDNF mRNA表達呈正相關,但與α-pro-GDNF mRNA表達無關。上述數據說明,α-和β-pro-GDNF剪接體在小鼠腦中呈差異表達。SorLA作為一種分選蛋白,可能導致GDNF剪接異構體mRNA與蛋白的反向表達。

文章研究成果發表在《中國神經再生研究(英文版)》雜誌2020年2月第2期。

文章摘要:膠質細胞源性神經營養因子(GDNF)在神經元存活和功能中起重要作用,有α-pro-GDNF和β-pro-GDNF兩種剪切體,這兩種剪切體對多巴胺神經元具有重要的保護作用。但是,目前仍然缺乏GDNF剪接體在富含多巴胺能神經元的腦區中表達的研究。(1)為了確定正常小鼠腦中α-和β-pro-GDNF的mRNA表達,實驗成功設計並製備了GDNF剪接體的特異性引物,隨後進行實時熒光定量PCR檢測發現,小鼠腦組織β-pro-GDNF的mRNA表達顯著強於α-pro-GDNF的mRNA表達。為了評估小鼠腦組織中α-和β-pro-GDNF的蛋白表達,進行了免疫印跡檢測。結果顯示,β-pro-GDNF的蛋白表達顯著低於α-pro-GDNF的蛋白表達,與mRNA表達結果相反;(2)為了探索GDNF剪接體轉錄和翻譯水平反向表達的可能原因,用實時熒光定量PCR分析了GDNF剪接體與分選蛋白相關受體A(SorLA)mRNA表達的關係。發現小鼠腦中SorLA mRNA與β-pro-GDNF mRNA表達呈正相關,但與α-pro-GDNF mRNA表達無關;(3)上述數據顯示,α-和β-pro-GDNF剪接體在小鼠腦中呈差異表達。SorLA作為一種分選蛋白,可能導致GDNF剪接異構體mRNA與蛋白的反向表達。實驗已於2016年7月14日經中國徐州醫科大學動物倫理委員會批准。

文章關鍵詞:膠質細胞源性神經營養因子;剪切體;膠質細胞源性神經營養因子前體α;膠質細胞源性神經營養因子前體β;分選蛋白相關受體A;小鼠腦;腦區;多巴胺能神經元;Δ78位點;前體蛋白;神經再生

文章來源:Gu XH, Li H, Zhang L, He T, Chai X, Wei H, Gao DS (2020) Differential expression of glial cell line-derived neurotrophic factor splice variants in the mouse brain. Neural Regen Res 15(2):270-276.


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