两种剪切体在小鼠脑中的差异表达

胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在神经元存活和功能中起重要作用,有α-pro-GDNF和β-pro-GDNF两种剪切体。这两种剪切体对多巴胺神经元具有重要的保护作用。但是,目前仍然缺乏GDNF剪接体在富含多巴胺能神经元的脑区中表达的研究。

中国徐州医科大学顾笑赫等在其一项最新研究中成功设计并制备了GDNF剪接体的特异性引物,随后进行实时荧光定量PCR检测发现,小鼠脑组织β-pro-GDNF的mRNA表达显著强于α-pro-GDNF的mRNA表达。为了评估小鼠脑组织中α-和β-pro-GDNF的蛋白表达,进行了免疫印迹检测。结果显示,β-pro-GDNF的蛋白表达显著低于α-pro-GDNF的蛋白表达,与mRNA表达结果相反。为了探索GDNF剪接体转录和翻译水平反向表达的可能原因,用实时荧光定量PCR分析了GDNF剪接体与分选蛋白相关受体A(SorLA)mRNA表达的关系发现,小鼠脑中SorLA mRNA与β-pro-GDNF mRNA表达呈正相关,但与α-pro-GDNF mRNA表达无关。上述数据说明,α-和β-pro-GDNF剪接体在小鼠脑中呈差异表达。SorLA作为一种分选蛋白,可能导致GDNF剪接异构体mRNA与蛋白的反向表达。

文章研究成果发表在《中国神经再生研究(英文版)》杂志2020年2月第2期。

文章摘要:胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在神经元存活和功能中起重要作用,有α-pro-GDNF和β-pro-GDNF两种剪切体,这两种剪切体对多巴胺神经元具有重要的保护作用。但是,目前仍然缺乏GDNF剪接体在富含多巴胺能神经元的脑区中表达的研究。(1)为了确定正常小鼠脑中α-和β-pro-GDNF的mRNA表达,实验成功设计并制备了GDNF剪接体的特异性引物,随后进行实时荧光定量PCR检测发现,小鼠脑组织β-pro-GDNF的mRNA表达显著强于α-pro-GDNF的mRNA表达。为了评估小鼠脑组织中α-和β-pro-GDNF的蛋白表达,进行了免疫印迹检测。结果显示,β-pro-GDNF的蛋白表达显著低于α-pro-GDNF的蛋白表达,与mRNA表达结果相反;(2)为了探索GDNF剪接体转录和翻译水平反向表达的可能原因,用实时荧光定量PCR分析了GDNF剪接体与分选蛋白相关受体A(SorLA)mRNA表达的关系。发现小鼠脑中SorLA mRNA与β-pro-GDNF mRNA表达呈正相关,但与α-pro-GDNF mRNA表达无关;(3)上述数据显示,α-和β-pro-GDNF剪接体在小鼠脑中呈差异表达。SorLA作为一种分选蛋白,可能导致GDNF剪接异构体mRNA与蛋白的反向表达。实验已于2016年7月14日经中国徐州医科大学动物伦理委员会批准。

文章关键词:胶质细胞源性神经营养因子;剪切体;胶质细胞源性神经营养因子前体α;胶质细胞源性神经营养因子前体β;分选蛋白相关受体A;小鼠脑;脑区;多巴胺能神经元;Δ78位点;前体蛋白;神经再生

文章来源:Gu XH, Li H, Zhang L, He T, Chai X, Wei H, Gao DS (2020) Differential expression of glial cell line-derived neurotrophic factor splice variants in the mouse brain. Neural Regen Res 15(2):270-276.


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